Anticorps polyclonal de lapin anti-PTPN2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P17706

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la PTPN2

• La tyrosine-protéine phosphatase non réceptrice de type 2 (PTPN2), également connue sous le nom de tyrosine-phosphatase des protéines des lymphocytes T (TCPTP), est une phosphatase non réceptrice spécifique des tyrosines qui déphosphoryle les tyrosine kinases protéiques réceptrices et non réceptrices, notamment INSR, EGFR, JAK1, JAK2, JAK3 et les membres de la famille STAT, régulant ainsi négativement plusieurs voies de signalisation.
• Elle joue un rôle essentiel dans le développement et le fonctionnement du système immunitaire, en modulant les cascades de signalisation du récepteur des lymphocytes T, de l’interleukine-2, de l’interféron et d’autres cytokines ; les variants génétiques et la dérégulation de cette protéine sont impliqués dans les maladies auto-immunes et l’inflammation.
• Elle est exprimée de manière ubiquitaire, l’isoforme 1 étant principalement présente dans les lymphocytes T et le placenta, tandis que l’isoforme 2 est l’isoforme majoritaire dans de nombreux tissus, ce qui met en évidence des mécanismes de régulation spécifiques aux tissus.
• Elle se localise dans le réticulum endoplasmique, le compartiment intermédiaire réticulum endoplasmique-Golgi, le noyau, le cytoplasme et la membrane cellulaire, permettant un accès dépendant du contexte à divers substrats et nœuds de signalisation.
• Elle agit comme un régulateur métabolique essentiel en déphosphorylant le récepteur de l’insuline (INSR) et en contrôlant la production hépatique de glucose par l’intermédiaire de la voie IL-6/STAT3, ce qui la relie à l’homéostasie du glucose et au diabète de type 2.
• Le domaine catalytique de phosphatase est essentiel à son activité hydrolase ; des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et la S-nitrosylation modulent sa fonction enzymatique et sa distribution subcellulaire.
• Elle possède un segment C-terminal non catalytique qui peut intervenir dans les interactions protéine-protéine et le ciblage subcellulaire, et il a été rapporté qu’elle se lie à l’ADN, ce qui suggère des fonctions nucléaires supplémentaires au-delà de l’activité classique de phosphatase.
• En tant que membre de la famille des phosphatases des protéines tyrosine, elle contrecarre la signalisation des tyrosine kinases et participe à la déphosphorylation de cibles oncogéniques telles qu’EGFR et Src, ce qui en fait une cible d’intérêt pour la recherche sur le cancer.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 1-353 de la PTPN2 humaine (isoforme 1), y compris le domaine catalytique ; confirmez l’identité de séquence entre l’immunogène et la protéine cible dans l’espèce étudiée (humain, souris ou rat) en alignant l’accession NP_536348.1 ou UniProt P17706 avec les orthologues correspondants.
• Pour le Western blot, utilisez comme contrôles positifs des lysats de lymphocytes T Jurkat humains, de rate de souris ou de thymus de rat, qui expriment la PTPN2 ; attendez-vous à une bande proche de 48 kDa (le poids moléculaire prédit de l’isoforme 2 est de 48,5 kDa), avec d’éventuels signaux supplémentaires dus aux isoformes ou aux modifications post-traductionnelles.
• En immunofluorescence/immunocyt chimie, perméabilisez les cellules de manière appropriée afin de détecter les pools nucléaires et cytoplasmiques ; effectuez une co-coloration avec des marqueurs d’organites (par exemple, ER-Tracker ou des marqueurs de l’appareil de Golgi) si vous étudiez la dynamique du transport intracellulaire.
• En tant qu’anticorps polyclonal, il peut reconnaître plusieurs épitopes ; validez sa spécificité à l’aide d’une extinction par siRNA ou de lignées cellulaires knockout pour PTPN2, et comparez les profils d’expression avec ceux de bases de données publiques telles que Human Protein Atlas.
• Pour l’ELISA, optimisez les conditions de revêtement et la concentration d’anticorps ; utilisez la protéine PTPN2 recombinante comme standard afin de garantir une plage de détection linéaire.

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