Anticorps polyclonal anti-PTK6 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13882

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PTK6

• PTK6 (Protéine-tyrosine kinase 6), également connue sous le nom de kinase tumorale mammaire (BRK), est une protéine-tyrosine kinase non réceptrice de 52 kDa codée par le gène PTK6 (ID du gène : 5753).
• Elle joue un rôle dépendant du contexte dans la régulation de la différenciation et du maintien des cellules épithéliales, favorisant l'apoptose dans les tissus normaux tout en améliorant la prolifération, la survie et la migration dans un contexte tumorigène.
• Après stimulation par l'EGF, PTK6 phosphoryle ARAP1, ce qui retarde la dégradation d'EGFR et maintient la signalisation (PubMed:20554524). Références associées : PMID:20554524
• PTK6 interagit avec les membres de la famille EGFR (EGFR, ERBB2, ERBB3) et active les voies de signalisation en aval, notamment AKT, PI3K et STAT3/STAT5B, pour induire la signalisation oncogénique.
• La localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et les crêtes membranaires ; la PTK6 nucléaire est associée à la régulation de la croissance dans l'épithélium normal, tandis que la PTK6 cytoplasmique est associée à l'activation oncogénique.
• Elle est exprimée majoritairement dans les tissus épithéliaux, avec les niveaux les plus élevés dans le côlon, et est surexprimée dans de nombreux cancers, notamment les carcinomes du sein, de l'ovaire, du côlon et de la prostate ; elle n'est pas détectée dans le cœur, le cerveau, le foie ou les muscles.
• Modifications post-traductionnelles : classée comme phosphoprotéine (mots-clés UniProt), elle est régulée par des interactions intramoléculaires et des événements de phosphorylation qui contrôlent son activité kinase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 222–451, qui inclut une partie du domaine kinase ; l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes phosphorylées et non phosphorylées, mais le masquage de l'épitope par des modifications post-traductionnelles doit être pris en compte dans certaines conditions d'essai.
• Pour le Western blot, une bande de 52 kDa est attendue ; utilisez des contrôles positifs tels que des lysats de cellules de carcinome du côlon humain (par exemple HT-29) ou de cancer de la prostate (par exemple LNCaP). Validez la spécificité avec un knock-down médié par ARNsi ou des lignées cellulaires knock-out.
• En immunofluorescence, PTK6 peut se localiser à la fois dans les compartiments cytoplasmique et nucléaire ; une perméabilisation avec 0,1–0,5 % de Triton X-100 et une fixation soigneuse sont recommandées pour éviter les artefacts.
• Pour l'ELISA, le fragment d'immunogène recombinant peut servir d'antigène de revêtement positif ; incluez des contrôles négatifs appropriés pour évaluer le bruit de fond.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est prédite sur la base de l'homologie de séquence ; cependant, vérifiez-la dans l'espèce cible à l'aide de tissus ou de lysats cellulaires pertinents.

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