Anticorps monoclonal lapin anti-PTEN pour WB - P60484

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PTEN

• PTEN (phosphatase et tensine homologue) est une protéine phosphatase à double spécificité qui déphosphoryle les protéines phosphorylées sur tyrosine, sérine et thréonine. Références associées : PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• Il agit également comme une phosphatase lipidique, avec une préférence pour le phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PIP3), en éliminant le phosphate D3 pour générer du PIP2. Références associées : PMID:16824732 PMID:26504226 PMID:9593664
• Régulateur négatif central de la voie de signalisation PI3K-AKT/PKB ; par déphosphorylation du PIP3, il réduit l'activation d'AKT, modulant ainsi la progression du cycle cellulaire et la survie cellulaire. Références associées : PMID:31492966 PMID:37279284
• PTEN non phosphorylé coopère avec MAGI2 pour supprimer l'activation d'AKT1 ; la phosphorylation de PTEN modifie sa préférence de liaison de p85 vers DLC1, permettant la régulation par RHOA de la migration et de la polarité cellulaires. Références associées : PMID:11707428 PMID:26166433
• Déphosphoryle la kinase d'adhérence focale (FAK) et inhibe la migration cellulaire, l'étalement cellulaire médié par les intégrines et la formation d'adhérences focales. Références associées : PMID:22279049
• Impliqué dans la neurogenèse et la plasticité synaptique ; il est recruté dans la densité post-synaptique lors de l'activation des récepteurs NMDA pour moduler la dépression à long terme (DLT) et contrôle l'intégration des nouveaux neurones via la signalisation AKT-mTOR.
• Il se localise principalement dans le cytoplasme et le noyau, et est également présent dans les corps PML, les épines dendritiques et la densité post-synaptique ; il peut également être sécrété. Il est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus adultes, notamment le cœur, le cerveau, le placenta, le poumon, le foie, les muscles, les reins et le pancréas.
• Reconnu comme un suppresseur de tumeur ; la forme monoubiquitinée nucléaire présente un potentiel apoptotique plus élevé que la forme cytoplasmique non ubiquitinée. Références associées : PMID:10468583 PMID:18716620

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (résidus 304–403) de la PTEN humaine ; sa conservation chez la souris et le rat rend cet anticorps probablement adapté à la détection multi-espèces en Western blot et en immunohistochimie.
• En Western blot (WB), PTEN peut produire plusieurs bandes (~20 kDa, 47 kDa et 65 kDa) du fait de ses isoformes et de ses modifications post-traductionnelles ; il est recommandé d'inclure des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse pour préserver les états de phosphorylation.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), les conditions de démasquage antigénique (par exemple, tampon citrate pH 6,0 ou EDTA pH 8,0) doivent être optimisées de manière empirique, et la réactivité croisée avec les tissus de rongeurs doit être validée sur des contrôles appropriés.
• En immunoprécipitation (IP), l'origine IgG de lapin permet une compatibilité avec les billes standard Protéine A/G ; confirmez la sous-classe d'IgG pour une sélection optimale des billes.
• Pour l'immunofluorescence / immunocytochimie (IF/ICC), une perméabilisation avec 0,1–0,5 % de Triton X-100 et un blocage avec 5 % de BSA peuvent aider à réduire le bruit de fond non spécifique.

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