Anticorps monoclonal anti-PTEN pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P60484

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PTEN

• PTEN (phosphatase et tensine homologue) est une protéine phosphatase à double spécificité et une phosphatase lipidique, agissant comme un suppresseur de tumeur essentiel. L'immunogène correspond aux acides aminés 1-403 de l'isoforme canonique (UniProt P60484).
• En tant que phosphatase lipidique, PTEN déphosphoryle le phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PtdIns(3,4,5)P3) pour antagoniser la voie de signalisation PI3K-AKT/PKB, modulant ainsi la progression du cycle cellulaire, la survie et le métabolisme. Références associées : PMID:31492966 PMID:37279284
• Elle fonctionne également comme une protéine phosphatase, déphosphorylant les protéines phosphorylées sur tyrosine, sérine et thréonine, influençant de multiples cascades de signalisation. Références associées : PMID:9187108 PMID:9256433 PMID:9616126
• PTEN se localise dans de multiples compartiments sous-cellulaires, notamment le cytoplasme, le noyau, les corps PML, les épines dendritiques, la densité post-synaptique, et peut être sécrétée, ce qui reflète ses rôles multiples.
• Elle est exprimée à des niveaux relativement élevés dans tous les tissus adultes, notamment le cœur, le cerveau, le placenta, les poumons, le foie, les muscles, les reins et le pancréas.
• PTEN joue un rôle clé dans la migration cellulaire en déphosphorylant la kinase d'adhésion focale et en interagissant avec les complexes DLC1/TNS3 pour réguler l'activation de RHOA et RAC1 au bord avant et à la face postérieure des cellules en migration. Références associées : PMID:22279049 PMID:26166433
• Des modifications post-traductionnelles telles que la monoubiquitination influencent la localisation sous-cellulaire et la fonction apoptotique de PTEN ; la PTEN monoubiquitinée nucléaire présente un plus grand potentiel apoptotique. Références associées : PMID:10468583 PMID:18716620

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend la quasi-totalité de la PTEN humaine de longueur complète (aa 1-403), donc l'anticorps est supposé reconnaître la PTEN totale quel que soit son état de phosphorylation. Pour le Western blot, pensez à inclure des inhibiteurs de phosphatases dans votre tampon de lyse pour préserver les profils de phosphorylation endogènes de PTEN.
• PTEN migre à environ 47 kDa sur SDS-PAGE ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire adaptés et réalisez des contrôles positifs/négatifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules knock-out pour PTEN) pour confirmer l'identité de la bande.
• Pour l'immunoprécipitation, testez différents ratios anticorps/lysat et conditions d'incubation pour optimiser l'efficacité de capture. La performance de l'anticorps en IP a été démontrée ; cependant, les systèmes expérimentaux individuels peuvent nécessiter une optimisation.
• En immunofluorescence/ICC, PTEN présente une coloration à la fois cytoplasmique et nucléaire. Les méthodes de fixation et de perméabilisation peuvent affecter de manière significative les profils de localisation ; validez la coloration dans votre lignée cellulaire avec des profils d'expression de PTEN connus et utilisez des contrôles d'isotype.

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