Anticorps Monoclonal Lapin Anti-PTBP2 pour WB, IP, IF et IHC - Q9UKA9

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PTBP2

• Le PTBP2 (protéine de liaison à la tract polypyrimidine 2) est une protéine de liaison à l'ARN également connue sous le nom de PTB neural (nPTB), protéine de type PTB (PTBLP) ou brPTB. Il appartient à la famille hnRNP et est l'homologue enrichi dans les neurones/tissus neuraux du PTBP1 ubiquitaire.
• Se lie aux tracts polypyrimidiques introniques et médie la régulation négative de l'épissage des exons. Dans les tissus neuronaux, il peut antagoniser l'activateur d'épissage NOVA1 pour affiner la sélection des exons alternatifs.
• Joue des rôles supplémentaires dans la régulation de la traduction, reliant le contrôle post-transcriptionnel aux résultats de l'expression des gènes.
• Se localise principalement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle principal dans le traitement du pré-ARNm.
• Le PTBP2 subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler son activité, sa dynamique sous-cellulaire ou ses interactions protéiques.
• La protéine est principalement exprimée dans le cerveau, mais est également détectée dans le cœur et le muscle squelettique. Il existe plusieurs isoformes : les isoformes 1 et 2 sont spécifiques aux neurones, les isoformes 3 et 4 sont présentes dans les tissus non neuronaux, et les isoformes 5 et 6 sont des formes tronquées dans les cellules non neuronales.
• Présente une affinité de liaison à l'ARN intrinsèque réduite par rapport au PTBP1, une propriété qui peut influencer ses rôles régulateurs dans différents contextes cellulaires.

Guides Expérimentaux et Conseils Techniques

• L'immunogène est un peptide N-terminal (aa 1–100) du PTBP2 humain, une région hautement conservée chez l'humain, la souris et le rat. Cette conservation est probablement à l'origine de la réactivité croisée signalée.
• Pour l'analyse par Western blot, une bande prédominante près de 57 kDa correspondant au PTBP2 pleine longueur est attendue. Des bandes supplémentaires peuvent provenir d'isoformes alternatives ou de modifications post-traductionnelles ; vérifiez la spécificité à l'aide de témoins appropriés.
• Dans l'immunoprécipitation, envisagez de réticuler de manière covalente l'anticorps aux billes de protéine A/G pour minimiser la co-élution des chaînes lourdes/légères si celles-ci interfèrent avec la détection en aval.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), la localisation nucléaire du PTBP2 doit être confirmée. Optimisez la fixation (par exemple, PFA à 4 % pour l'IF, sections incluses en paraffine et fixées au formol pour l'IHC) et la perméabilisation (par exemple, Triton X-100 à 0,1–0,2 %) pour obtenir une récupération adéquate de l'épitope et une clarté du signal.
• L'expression du PTBP2 étant la plus élevée dans les tissus neuronaux, utilisez du tissu cérébral ou des lignées cellulaires neuronales comme témoins positifs ; les cellules non neuronales peuvent exprimer des niveaux plus faibles ou des isoformes distincts.
• Lors de l'utilisation d'ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement préserve la conformation native de la région N-terminale pour maintenir la liaison de l'anticorps.

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