Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-PSMB10 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P40306

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PSMB10

• Le PSMB10 code la sous-unité bêta de type 10 du protéasome, également connue sous le nom de LMP10, MECL1 ou bêta2i. Il s'agit d'un composant catalytique de l'immunoprotéasome qui remplace les sous-unités constitutives du protéasome lors d'une stimulation immunitaire.
• Il présente des activités de type chymotrypsine et trypsine, clivant les liaisons peptidiques après des résidus hydrophobes et basiques, et est essentiel pour la génération de peptides antigéniques présentés par les molécules de classe I du CMH.
• Le PSMB10 est induit par l'interféron-gamma et s'incorpore à l'immunoprotéasome, modifiant la spécificité de clivage pour favoriser la production de peptides ayant une affinité plus élevée pour la liaison au CMH de classe I, améliorant ainsi les réponses immunitaires adaptatives.
• La protéine est localisée à la fois dans le cytoplasme et le noyau, où elle participe au protéolyse dépendante et indépendante de l'ubiquitine, contribuant au contrôle de la qualité des protéines et à la régulation du cycle cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la phosphorylation, et la protéine est synthétisée sous forme de zymogène inactif qui est activé par l'élimination autocatalytique de son propeptide.
• Des mutations dans le PSMB10 ont été liées à des syndromes auto-inflammatoires associés au protéasome (par exemple, PRAAS5), soulignant l'importance clinique d'une fonction adéquate de l'immunoprotéasome.
• Le PSMB10 interagit avec des protéines virales et son activité protéasique peut être modulée lors des interactions hôte-virus, influençant potentiellement le traitement des antigènes viraux et l'évasion immunitaire.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène utilisé correspond à la protéine PSMB10 humaine pleine longueur (acides aminés 1-273), garantissant que l'anticorps polyclonal reconnaisse plusieurs épitopes natifs ; pour le WB, une bande proche de 29 kDa est attendue, bien que des formes précurseurs puissent être visibles.
• En IHC-P et IF/ICC, anticipez à la fois des motifs de coloration cytoplasmique et nucléaire ; un marquage double avec des marqueurs du protéasome ou de l'immunoprotéasome (par exemple, PSMB8, PSMB9) peut aider à confirmer la spécificité.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser des complexes d'immunoprotéasome recombinants ou du PSMB10 purifié comme antigènes de revêtement pour établir la sensibilité de l'essai et sa plage dynamique.
• En raison de la forte homologie de séquence, l'anticorps est censé réagir de manière croisée avec le PSMB10 de souris et de rat ; cependant, vérifiez toujours la réactivité dans votre espèce et tissu d'intérêt en utilisant des témoins appropriés (par exemple, des lysats de tissus de modèles sauvages et knock-out).
• Lors de l'étude de la dynamique de l'immunoprotéasome, un traitement à l'interféron-gamma ou d'autres stimuli immunitaires peut être utilisé pour augmenter l'expression du PSMB10 dans les cellules cultivées ; incluez des témoins non traités pour différencier l'expression constitutive de l'expression inductible.
• Pour les études fonctionnelles, des inhibiteurs du protéasome (par exemple, épomycine, bortézomib) peuvent être employés pour valider la spécificité de l'anticorps en bloquant l'activité catalytique, mais notez que le traitement par inhibiteur peut affecter la composition des sous-unités.

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