Anticorps polyclonal anti-PSMA/FOLH1 pour WB et ELISA - Q04609

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PSMA/FOLH1

• PSMA/FOLH1 (glutamate carboxypeptidase 2) est une métalloenzyme multifonctionnelle à zinc codée par le gène FOLH1, également connue sous les noms de GCPII, NAALADase I ou folate hydrolase 1. Plusieurs isoformes existent, PSMA' étant prédominante dans la prostate normale et PSMA-1/PSMA-9 étant associées aux tumeurs de la prostate.
• Elle possède une double activité enzymatique : hydrolase des folates (clivage du folylpoly-γ-glutamate) et NAALADase (hydrolyse du N-acétylaspartylglutamate, NAAG). Dans l’intestin, elle facilite l’absorption des folates alimentaires ; dans le cerveau, elle régule la neurotransmission glutamatergique en dégradant le NAAG et en libérant du glutamate.
• Elle joue un rôle bien documenté dans la progression des tumeurs de la prostate ; elle est constamment fortement exprimée dans l’épithélium prostatique et significativement surexprimée dans les cancers de la prostate primitifs et métastatiques.
• Sa localisation subcellulaire se situe principalement au niveau de la membrane cellulaire, sous forme de glycoprotéine transmembranaire de type II dotée d’une queue cytoplasmique, mais elle peut également être détectée dans le cytoplasme.
• Sa distribution tissulaire est large : elle est fortement exprimée dans la prostate, le cerveau (striatum ventral, tronc cérébral), le rein, le foie et l’intestin grêle (bordure en brosse jéjunale). Des niveaux plus faibles sont observés dans la vessie, les testicules, les ovaires et d’autres organes. L’expression des isoformes varie entre les tissus normaux et malins.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la N-glycosylation et la phosphorylation ; l’enzyme nécessite deux ions zinc et du calcium pour son activité catalytique et sa stabilité structurale.
• In vitro, elle présente une activité supplémentaire de type dipeptidyl-peptidase IV, clivant des substrats tels que Gly-Pro-AMC, ce qui témoigne de sa polyvalence dans l’hydrolyse des liaisons peptidiques.
• Elle est classée par UniProt comme une enzyme multifonctionnelle, une métalloprotéase et une carboxypeptidase ; elle est soumise à un épissage alternatif donnant naissance à des isoformes fonctionnellement distinctes.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène est un peptide synthétique situé entre les acides aminés 50 et 150 du domaine extracellulaire de la PSMA/FOLH1 humaine. Cette région est conservée chez l’humain, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, une bande proche de 84 kDa est attendue dans les lignées cellulaires de cancer de la prostate humaines (p. ex. LNCaP, PC-3) ou les homogénats de tissus prostatiques. Vérifiez la spécificité en incluant les contrôles appropriés et envisagez une récupération antigénique en cas d’utilisation sur des coupes incluses en paraffine pour l’IHC (non validée ici).
• Dans les applications ELISA, l’anticorps peut servir de réactif de capture ou de détection. L’association avec un anticorps monoclonal dirigé contre un épitope non chevauchant pourrait améliorer la sensibilité des dosages sandwich. La réactivité croisée avec des échantillons de rongeurs doit être évaluée empiriquement.
• Comme les anticorps polyclonaux reconnaissent plusieurs épitopes, la cohérence entre les lots doit être surveillée dans les dosages quantitatifs. Des expériences pilotes avec un standard de référence sont recommandées avant les études à grande échelle.

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