Anticorps monoclonal anti-PSMA/FOLH1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q04609

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PSMA/FOLH1

• La PSMA/FOLH1 (Glutamate carboxypeptidase 2) est une enzyme multifonctionnelle possédant à la fois une activité folate hydrolase et N-acétylé-alpha-liée acide dipeptidase (NAALADase), avec une préférence pour les peptides tri-alpha-glutamate.
• Dans l'intestin, elle facilite l'absorption des folates en clivant les folates polyglutamylés, tandis que dans le cerveau, elle module la neurotransmission glutamatergique en hydrolysant le neuropeptide NAAG pour libérer du glutamate.
• La protéine est impliquée dans la progression des tumeurs prostatiques, et une expression spécifique aux isoformes a été observée : PSMA' prédomine dans la prostate normale, PSMA-1 dans les tumeurs primaires, et PSMA-9 est spécifiquement exprimée dans le cancer de la prostate.
• Au niveau subcellulaire, elle est ancrée à la membrane cellulaire via un domaine transmembranaire signal-ancre, mais elle se localise également dans le cytoplasme.
• Elle présente en outre une activité de type dipeptidyl-peptidase IV, clivant des substrats tels que Gly-Pro-AMC in vitro.
• En tant que métalloprotéase dépendante du zinc, elle nécessite du zinc et du calcium pour sa fonction catalytique et subit une glycosylation et une phosphorylation, ce qui contribue à un poids moléculaire apparent supérieur aux 84 kDa prédits.
• La distribution tissulaire est large mais maximale dans l'épithélium prostatique, avec une expression significative également dans le rein, le cerveau, l'intestin grêle et divers endothéliums tumoraux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu du domaine extracellulaire (aa 50-150) de la PSMA/FOLH1 humaine, accessible dans des conditions natives et dénaturantes, ce qui favorise son utilisation dans les applications WB, IHC-P et ELISA.
• En Western Blot, notez que la glycosylation peut entraîner une migration de la bande à 100–120 kDa plutôt qu'aux 84 kDa prédits ; validez la bande observée en utilisant des contrôles positifs ou des échantillons de knockdown/knockout.
• Pour l'IHC-P, la récupération d'antigène avec un tampon citrate ou EDTA (pH 6,0–9,0) est souvent bénéfique ; le titrage et l'optimisation dans le type de tissu concerné sont recommandés.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat permet des études précliniques sur des modèles courants ; confirmez les niveaux d'expression endogènes dans le tissu/la lignée cellulaire d'intérêt avant de procéder à des expériences à grande échelle.

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