Anticorps polyclonal de lapin anti-PSIP1 pour WB, ELISA - O75475

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PSIP1

• PSIP1, également appelé LEDGF, DFS70, p75/p52 et PAIP, est un coactivateur transcriptionnel qui joue un rôle essentiel dans la différenciation des cellules souches neuroépithéliales et la neurogenèse, notamment dans la régulation génique et les réponses au stress des cellules épithéliales du cristallin.
• La protéine existe sous plusieurs isoformes ; l'isoforme 2 (p75) agit comme un coactivateur transcriptionnel plus général et plus puissant, et pourrait également fonctionner comme adaptateur pour coordonner l'épissage du pré-ARNm, tandis que l'isoforme 1 (p52) est moins bien caractérisée.
• PSIP1 agit comme cofacteur cellulaire pour l'intégration des lentivirus, liant les complexes de pré-intégration à la chromatine de l'hôte via son domaine de liaison à l'intégrase, une fonction critique pour la réplication du VIH-1.
• La localisation subcellulaire est exclusivement nucléaire, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la transcription, l'épissage et l'intégration virale.
• La protéine est largement exprimée, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus et une expression marquée dans le cerveau fœtal et adulte, notamment dans la zone sous-ventriculaire, l'hippocampe et le neuroépithème germinal ; l'expression est nettement plus élevée dans le cerveau fœtal que dans le cerveau adulte.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, la citrullination et la conjugaison à l'ubiquitine, qui peuvent réguler son activité et ses interactions.
• Les caractéristiques structurelles supplémentaires incluent un domaine à bobine superenroulée et une région de liaison à l'ADN, qui facilitent son association à la chromatine et la régulation transcriptionnelle.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps a été généré à l'aide d'un immunogène protéique recombinant couvrant les acides aminés 301-530 de PSIP1 humaine, qui correspond à la région C-terminale englobant le domaine de liaison à l'intégrase et une partie du domaine à bobine superenroulée ; il devrait reconnaître les deux isoformes principales (p75 et p52).
• Pour le Western blot (WB), il est recommandé d'utiliser des extraits nucléaires de lignées cellulaires pertinentes telles que HeLa ou les précurseurs neuronaux, et de noter la bande prédite autour de 60 kDa ; en raison de la variation des isoformes et des modifications post-traductionnelles, plusieurs bandes peuvent être observées.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat rend cet anticorps adapté aux études comparatives sur modèles rongeurs, mais il convient de valider la spécificité dans le système d'échantillons concerné.
• Pour l'ELISA, il est recommandé d'utiliser des antigènes peptidiques ou protéiques recombinants pour évaluer l'affinité de liaison ; l'ELISA direct peut être utilisé pour la détermination du titre, tandis que l'ELISA sandwich peut nécessiter des anticorps appariés.

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