Anticorps monoclonal lapin Anti-PSAP (Validé par KD) pour WB, IHC-P, ELISA - P07602

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PSAP

• La prosaposine (PSAP) est une protéine précurseur clivée par protéolyse pour donner quatre peptides saposine homologues (saposine A, B, C et D), chacun fonctionnant comme protéine activatrice non enzymatique pour des enzymes lysosomales spécifiques de dégradation des sphingolipides.
• Les saposines facilitent l'hydrolyse des sphingolipides en extrayant les substrats lipidiques des membranes et en les présentant à leurs enzymes respectives, avec des spécificités lipidiques et enzymatiques distinctes mais partiellement chevauchantes entre les membres de la famille.
• La PSAP agit également comme facteur myélinotrophique et neurotrophique, médiant ses effets par l'intermédiaire des récepteurs couplés aux protéines G GPR37 et GPR37L1, conduisant à l'internalisation du récepteur et à la signalisation par phosphorylation d'ERK.
• En tant que cofacteur lysosomal essentiel, la PSAP/les saposines activent diverses enzymes : galactocérébrosidase (GALC) pour le galactosylcéramide, arylsulfatase A pour les sulfatides, β-galactosidase pour les gangliosides GM1, α-galactosidase A pour le globotriaosylcéramide, et β-glucosylcéramidase acide (glucocérébrosidase) pour le glucosylcéramide.
• La saposine D stimule principalement la céramidase acide et la sphingomyélinase acide, le catabolisme du céramide étant son rôle physiologique principal.
• Subcellulairement, la prosaposine est localisée dans les lysosomes et est également sécrétée ; elle est impliquée dans le métabolisme des glycosphingolipides et a été impliquée dans des troubles neurodégénératifs tels que la maladie de Gaucher, la maladie de Parkinson et la leucodystrophie métachromatique.
• La protéine subit un épissage alternatif et contient des ponts disulfures ; son poids moléculaire est d'environ 58 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps monoclonal a été généré à partir d'un fragment recombinant correspondant aux acides aminés 275–524, qui englobe les domaines saposine B, C, D ; par conséquent, il peut détecter à la fois la prosaposine pleine longueur et ses formes de saposine traitées dans les types d'échantillons appropriés.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit de la prosaposine pleine longueur est de 58 kDa ; des bandes supplémentaires correspondant aux saposines individuelles (~10–15 kDa) peuvent être observées en fonction du traitement lysosomal. Envisagez d'optimiser les conditions de préparation et de chargement des échantillons.
• Pour l'immunohistochimie, validez dans des tissus connus pour exprimer des niveaux élevés de PSAP, tels que le cerveau, le rein et la rate, et envisagez des marqueurs d'enrichissement lysosomal pour la colocalisation.
• Pour l'ELISA, associez-le à un anticorps de capture ou un standard d'antigène soigneusement sélectionné, et validez dans le système d'échantillon approprié pour garantir la spécificité et la sensibilité.

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