Anticorps monoclonal lapin Anti-PSA/KLK3 pour WB, ELISA - P07288

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PSA/KLK3

• L'antigène prostatique spécifique (PSA), également appelé gamma-séméinoprotéine, kallikréine-3 (KLK3), antigène P-30 ou séménogélase, est un membre de la famille des kallikréines tissulaires de sérine protéases, codé par le gène KLK3 (GeneID 354).
• La protéine est synthétisée sous forme de préproenzyme, transformée en zymogène, puis finalement activée par clivage pour donner la glycoprotéine mature d'environ 29 kDa (UniProt : P07288).
• PSA est majoritairement exprimé dans les cellules épithéliales prostatiques et sécrété dans le plasma séminal et le sérum ; sa nature sécrétée est confirmée par l'annotation « Secrété » et la localisation subcellulaire.
• Sa fonction physiologique principale est l'hydrolyse de la séménogéline-1, la principale protéine formant le gel dans le sperme, ce qui entraîne la liquéfaction du coagulum séminal et facilite la motilité des spermatozoïdes.
• PSA appartient à la famille élargie des kallikréines regroupée sur le chromosome 19 ; l'épissage alternatif du gène KLK3 génère plusieurs isoformes.
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la formation de ponts disulfures, la glycosylation et le traitement protéolytique du zymogène ; elle contient un peptide signal pour la sécrétion.
• Des études structurales (mot-clé : structure 3D) ont permis d'élucider la triade catalytique et la poche de liaison au substrat typiques des sérines protéases de type trypsine.
• PSA a été directement identifié par séquençage protéique et protéomique, et sert de protéine de référence pour le protéome humain (mots-clés : Séquençage protéique direct, Identification protéomique, Protéome de référence).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une séquence de la protéine PSA mature (acides aminés 162–261), en évitant les régions du peptide signal et du propeptide. Cette région est susceptible de générer des anticorps reconnaissant à la fois la PSA libre et la PSA complexée à des inhibiteurs.
• Pour l'analyse par Western blot (WB), un protocole de SDS-PAGE réducteur est recommandé ; attendez une bande correspondant à la protéine mature d'environ 29 kDa. Des lignées cellulaires dérivées de la prostate (par exemple LNCaP) ou du plasma séminal humain peuvent servir de contrôle positif.
• Lors du développement de tests ELISA, l'association de cet anticorps monoclonal avec un anticorps de détection ciblant un épitope non chevauchant peut améliorer la sensibilité. Validez les performances avec des standards de PSA recombinant et des échantillons cliniques pour confirmer la spécificité.
• À noter que cet anticorps est validé pour la PSA humaine ; aucune réactivité croisée avec d'autres kallikréines n'a été rapportée.

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