Anticorps monoclonal de lapin anti-PRP19 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UMS4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PRP19

• PRPF19 (Facteur de traitement du pré-ARNm 19, également connu sous le nom de PRP19, SNEV, PSO4, NMP200, hPSO4) est une protéine de 55 kDa qui agit comme une ligase ubiquitine-protéine et composant central de multiples complexes impliqués dans l'épissage de l'ARNm et la réparation de l'ADN.
• Il est essentiel pour l'épissage des pré-ARNm en tant que composant du spliceosome (PubMed:28076346, PubMed:28502770, PubMed:29301961), et au sein du complexe PRP19C/NTC, il catalyse la polyubiquitination liée à la « Lys-63 » de la protéine PRPF3 de la snRNP U4 pour stabiliser la tri-snRNP U4/U5/U6 (PubMed:20595234).
  Références connexes : PMID:28076346, PMID:28502770, PMID:29301961, PMID:20595234
• Dans la réponse aux dommages de l'ADN, PRPF19 est recruté sur les sites de dommages par RPA et ubiquitine directement RPA1 et RPA2, permettant l'activation d'ATR-ATRIP (PubMed:24332808). Il participe également à la réparation des cassures double-brin de l'ADN via le recrutement de SETMAR (PubMed:18263876) et à la réparation des ponts interbrins (PubMed:16223718).
  Références connexes : PMID:24332808, PMID:18263876, PMID:16223718
• PRPF19 se localise principalement dans le noyau et le nucléoplasme, mais se trouve également au niveau du fuseau, du cytoplasme et des gouttelettes lipidiques, reflétant ses multiples rôles.
• Exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec une expression notablement plus faible dans les cellules sénescentes et des niveaux plus élevés dans les lignées cellulaires tumorales, suggérant un rôle dans la prolifération cellulaire et le cancer.
• La protéine contient des répétitions WD et un domaine U-box, la classant comme une E3 ubiquitine-transférase de type RING ; elle subit une acétylation et est elle-même sujette à l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 400-504 près de l'extrémité C-terminale ; vérifiez la conservation de cet épitope dans PRPF19 de souris et de rat (UniProt Q9UMS4, Q8BND5, Q5XI47) pour anticiper toute différence spécifique à l'espèce en matière de réactivité.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est de 55 kDa ; notez que les modifications post-traductionnelles ou les variants d'épissage peuvent produire des bandes supplémentaires ; incluez des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles de chargement appropriés.
• Dans l'immunoprécipitation et l'IF/ICC, évaluez les motifs de coloration nucléaire et cytoplasmique ; une fixation et une perméabilisation douces sont recommandées pour préserver la reconnaissance de l'épitope.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; le couplage avec un anticorps monoclonal dirigé contre un épitope non chevauchant peut améliorer la spécificité du test.
• En tant qu'anticorps monoclonal de lapin, cet anticorps est censé avoir une haute affinité et une faible variabilité d'un lot à l'autre ; toutefois, validez chaque nouveau lot dans votre système de test spécifique.

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