Anticorps polyclonal de lapin anti-Prothrombine (F2) pour WB et ELISA - P00734

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la prothrombine (F2)

• La prothrombine (facteur de coagulation II) est le précurseur zymogène de la thrombine, une sérine protéase qui joue un rôle central dans la coagulation sanguine, l'hémostase et la cicatrisation des plaies.
• La thrombine clive les liaisons peptidiques après les résidus d'arginine et de lysine, convertissant le fibrinogène soluble en fibrine insoluble pour former des caillots sanguins.
• En plus du fibrinogène, la thrombine active les facteurs de coagulation V, VII, VIII, XIII et, lorsqu'elle est liée à la thrombomoduline, active la protéine C, qui exerce des effets anticoagulants.
• La thrombine médie l'activation du facteur de coagulation XI (F11), un processus amélioré par les surfaces chargées négativement. Références connexes : PMID:2019570, PMID:21976677
• La thrombine déclenche également des réponses pro-inflammatoires dans les cellules endothéliales, induisant la production de cytokines telles que MCP-1/CCL2 et IL8/CXCL8. Références connexes : PMID:30568593, PMID:9780208
• La prothrombine est principalement synthétisée dans le foie et sécrétée dans le plasma, ce qui correspond à son rôle systémique dans la coagulation.
• La protéine contient plusieurs domaines structurels, y compris des domaines kringle et un domaine acide gamma-carboxyglutamique (GLA) qui facilite la liaison membranaire dépendante du calcium.
• Les modifications post-traductionnelles telles que la gamma-carboxylation et la formation de ponts disulfures sont essentielles pour son activité biologique.
• Les mutations du gène F2 sont associées à la thrombophilie et aux troubles hémorragiques.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante couvrant les acides aminés 364 à 622 de la prothrombine humaine, ciblant la région de la chaîne lourde de la thrombine ; cette conception peut permettre la détection de la prothrombine et des fragments de thrombine activée.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande majeure à environ 70 kDa pour la prothrombine de pleine longueur dans des conditions réductrices ; des bandes de poids moléculaire inférieur supplémentaires peuvent apparaître en raison du traitement protéolytique.
• Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal, validez les performances dans votre système d'échantillon spécifique (par exemple, plasma humain ou protéine recombinante) pour confirmer la spécificité et la cohérence d'un lot à l'autre.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; cependant, le couplage avec un anticorps monoclonal non chevauchant pourrait améliorer la sensibilité et réduire le bruit de fond.
• Les dilutions de travail optimales et les conditions d'incubation doivent être déterminées empiriquement pour chaque application ; les données publiées ou les protocoles standard peuvent servir de point de départ.

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