Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-Proteinase K - P06873

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Proteinase K

• La Proteinase K est une sérine protéase à large spectre initialement isolée du champignon Parengyodontium album (anciennement Tritirachium album), codée par le gène PROK.
• Elle appartient à la famille des sérines protéases de type subtilisine et est caractérisée par le triade catalytique classique (Asp-His-Ser) responsable de l'hydrolyse des liaisons peptidiques.
• L'enzyme clive de préférence les liaisons peptidiques adjacentes aux résidus d'acides aminés aromatiques et hydrophobes, permettant une dégradation efficace de la kératine et d'autres protéines récalcitrantes.
• La Proteinase K est synthétisée sous forme de préproprotéine avec un peptide signal et un propeptide, qui sont éliminés par protéolyse pour donner l'enzyme mature active d'environ 28,9 kDa (forme mature) avec un poids moléculaire total de la préprotéine d'environ 40,3 kDa.
• Sa stabilité et son activité sont renforcées par la liaison du calcium, qui protège contre l'autolyse et la dénaturation thermique ; deux ponts disulfure stabilisent en outre la structure tertiaire.
• Les structures tridimensionnelles ont été résolues (par ex., entrées PDB), révélant un repliement typique de type subtilisine avec une fente de liaison au substrat profonde.
• En raison de sa robuste activité protéolytique à large spectre, la Proteinase K est largement utilisée en biologie moléculaire pour l'élimination des protéines lors de la purification des acides nucléiques et dans diverses applications industrielles.

Guide Expérimental et Conseils Techniques

• L'immunogène est une protéine recombinante de Proteinase K, qui peut présenter des épitopes natifs et dénaturés ; tenez-en compte lors du choix entre des conditions natives ou dénaturantes pour votre test.
• Pour le WB, assurez une préparation d'échantillon appropriée, y compris des tampons de lyse adaptés et des inhibiteurs de protéases pour éviter la dégradation de la cible. Utilisez un anticorps secondaire anti-lapin approprié et optimisez le blocage pour réduire le bruit de fond.
• Pour l'ELISA, validez le test avec des contrôles positifs et négatifs connus ; la réactivité de l'anticorps avec l'antigène natif par rapport à l'antigène immobilisé peut différer, alors envisagez des stratégies d'immobilisation de l'antigène.

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