Anticorps monoclonal anti-Prolyl hydroxylase PHD1 (EGLN2) pour WB - Q96KS0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Prolyl hydroxylase PHD1 (EGLN2)

• La Prolyl hydroxylase EGLN2 (également connue sous le nom de PHD1, HIF-PH1 et EIT6) agit comme un capteur cellulaire d'oxygène qui catalyse l'hydroxylation des résidus proline dans les sous-unités alpha du facteur inductible par l'hypoxie (HIF-α), reconnaissant de préférence le motif LXXLAP. Références associées : PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:15925519

• Sous conditions normoxiques, EGLN2 hydroxyle des prolines spécifiques dans les domaines de dégradation dépendants de l'oxygène de HIF1A et HIF2A, les ciblant ainsi pour une ubiquitination médiée par VHL et une dégradation protéasomale, tandis que l'hypoxie atténue cette réaction, stabilisant HIF-α et favorisant l'expression des gènes hypoxiques. Références associées : PMID:11595184 PMID:12039559 PMID:12181324 PMID:15925519

• Au-delà de la régulation de HIF, EGLN2 hydroxyle d'autres substrats : CEP192, reliant la détection de l'oxygène à la dynamique du centrosome et à la formation des cils primaires ; IKBKB, médiant l'activation de NF-κB dans l'hypoxie ; et ATF4, réduisant sa stabilité protéique (hydroxylation d'ATF4 par similarité). Références associées : PMID:23932902 PMID:17114296

• EGLN2 se localise principalement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la modulation des facteurs de transcription et des événements de signalisation nucléaire.

• Son expression tissulaire est large, avec les niveaux les plus élevés dans le cerveau adulte, le placenta, le poumon, le rein et le testicule ; elle est également présente dans le cœur, le foie, le muscle squelettique et les tissus sensibles aux hormones tels que l'épithélium mammaire et ovarien.

• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation et l'ubiquitination, et la protéine nécessite du fer et de la vitamine C comme cofacteurs pour son activité dioxygénase ; une initiation alternative génère des isoformes.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps a été généré en utilisant un peptide synthétique couvrant les acides aminés N-terminaux 1–100 de l'EGLN2 humain ; il peut reconnaître à la fois la protéine pleine longueur et les variants N-terminaux. Envisagez un alignement de séquences si la réactivité croisée avec d'autres espèces ou isoformes est critique.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 44 kDa est attendue ; validez la détection dans votre type d'échantillon spécifique en utilisant des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• L'anticorps est validé pour l'ELISA et réagit de manière croisée avec des échantillons humains, murins et de rat, facilitant les études translationnelles ; l'optimisation des conditions de revêtement et des systèmes de détection est recommandée.
• Étant donné que l'expression d'EGLN2 est sensible à l'oxygène, envisagez de réaliser des expériences dans des conditions normoxiques et hypoxiques pour observer les changements induits par l'hypoxie, en utilisant si nécessaire des réactifs pour stabiliser HIF-α.

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