Anticorps monoclonal lapin anti-PRODH pour WB, IP, IHC-P, ELISA - O43272

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PRODH

• PRODH (proline déshydrogénase 1), également appelé oxydase de la proline, POX, PIG6 ou HSPOX2, est une enzyme mitochondriale codée par le gène PRODH chez l'homme.
• Elle catalyse la première étape de la dégradation de la proline, convertissant la L-proline en delta-1-pyrroline-5-carboxylate (P5C), une réaction essentielle qui relie le métabolisme de la proline au cycle de l'urée et au cycle de Krebs (TCA).
• En tant qu'oxydoréductase dépendante du FAD, PRODH transfère les électrons de la proline directement vers la chaîne de transport d'électrons mitochondriale, contribuant à la production d'ATP et à la génération d'espèces réactives de l'oxygène.
• La protéine est localisée dans la matrice mitochondriale, ce qui est cohérent avec son rôle dans le catabolisme des acides aminés et le métabolisme énergétique.
• PRODH est exprimé majoritairement dans le poumon, le muscle squelettique et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le cœur et le rein, et une expression faible dans le foie, le placenta et le pancréas.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, qui régule potentiellement l'activité enzymatique ou la stabilité ; les variations génétiques et les déficits sont associés à l'hyperprolinémie de type I et à une susceptibilité à la schizophrénie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 321–600 de la PRODH humaine, une région bien conservée entre les espèces ; cela confirme la réactivité avec les orthologues de souris et de rat.
• Pour le western blotting, nous vous recommandons de commencer avec une dilution de 1:500–1:2000, puis d'ajuster en fonction de l'abondance de la cible dans votre échantillon ; la taille attendue de la bande est d'environ 68 kDa.
• En immunoprécipitation, optimisez les conditions de conjugaison anticorps-billes et de tampon de lyse pour préserver les interactions protéiques natives ; incluez des contrôles IgG appropriés.
• Pour l'immunohistochimie (coupes incluses en paraffine), un démasquage antigénique avec un tampon citrate (pH 6,0) est souvent bénéfique ; validez la spécificité du marquage avec des tissus positifs et négatifs connus.
• Les performances en ELISA peuvent nécessiter l'association avec un anticorps de détection adapté ; testez la linéarité et la sensibilité en utilisant la protéine PRODH recombinante comme étalon.

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