Anticorps polyclonal de lapin anti-PPP4C pour WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P60510

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PPP4C

• Le gène PPP4C code pour la sous-unité catalytique de la sérine/thréonine-protéine phosphatase 4 (PP4), également appelée protéine phosphatase X (PP-X).
• La PP4 est une phosphatase ubiquitaire impliquée dans de nombreux processus cellulaires, notamment l'organisation des microtubules aux centrosomes, la maturation des snRNP spliceosomaux, l'apoptose, la réparation de l'ADN, la signalisation du TNF-alpha, l'activation de JNK, la régulation de l'acétylation des histones, la signalisation des points de contrôle des dommages à l'ADN, l'activation de NF-kappa-B et la migration cellulaire.
• La PP4 forme des complexes distincts avec des sous-unités régulatrices telles que PPP4R1, PPP4R2 et PPP4R3A, qui confèrent la spécificité du substrat : par exemple, le complexe PPP4C-PPP4R2-PPP4R3A déphosphoryle le gamma-H2AX au niveau des sites de dommages à l'ADN, tandis que le complexe PPP4C-PPP4R1 peut réguler HDAC3.
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme et le noyau, avec un enrichissement au niveau du centrosome et du centre d'organisation des microtubules, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation du cytosquelette et la mitose.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation et la méthylation, et l'enzyme requiert du manganèse comme cofacteur pour son activité hydrolase.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-307 de la PPP4C humaine (NP_002711.1), qui représente la sous-unité catalytique entière ; cette conception est censée générer des anticorps polyclonaux reconnaissant de multiples épitopes.
• Pour l'analyse par Western blot, une bande principale d'environ 35 kDa est attendue ; cependant, des modifications post-traductionnelles ou la formation de complexes peuvent entraîner l'apparition de bandes supplémentaires : validez systématiquement dans le système d'échantillons concerné.
• En immunohistochimie (IHC-P) et en immunofluorescence (IF/ICC), gardez à l'esprit que la PPP4C se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, avec un enrichissement au niveau des centrosomes ; des protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés doivent être testés.
• Pour les applications d'immunoprécipitation (IP) et d'ELISA, des conditions standard peuvent être utilisées ; notez qu'en tant que préparation polyclonale, la réticulation aux billes ou l'utilisation d'un anticorps pontant peut améliorer l'efficacité de capture.
• La réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat est confirmée, mais un alignement de séquence et une confirmation préliminaire dans l'espèce d'étude sont recommandés avant les essais à haut débit.

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