Anticorps polyclonal de lapin anti-PPP1R15A (GADD34) pour WB, IF/ICC, ELISA - O75807

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PPP1R15A

• Identité de la protéine : Également connue sous le nom de GADD34, protéine inductible par l'arrêt de croissance et les dommages à l'ADN, et homologue de MyD116. Encodée par le gène PPP1R15A (GeneID : 23645, SWISS : O75807). Poids moléculaire UniProt ~73,5 kDa ; observé ~73 kDa.
• Fonction principale : Recrute la protéine phosphatase 1 (PP1) pour déphosphoryler le facteur d'initiation de la traduction eIF-2A, inversant l'arrêt de la synthèse protéique induit par le stress et facilitant la récupération cellulaire après un stress. Références connexes : PMID:26095357 PMID:26742780
• Modulation de la voie TGF-β : Régule négativement la signalisation TGF-bêta en favorisant la déphosphorylation médiée par PP1 de TGFB1. Références connexes : PMID:14718519
• Apoptose : Peut favoriser l'apoptose en induisant la phosphorylation de p53 sur la Ser-15. Références connexes : PMID:14635196
• Autophagie : Essentielle pour une autophagie soutenue en régulant la traduction pendant la privation, permettant ainsi la biogenèse des lysosomes et le flux autophagique. Références connexes : PMID:32978159
• Facteur de restriction virale : Atténue la réplication du VIH-1 en inhibant la traduction médiée par l'ARN TAR. Références connexes : PMID:31778897
• Infection microbienne : Favorise la réplication de l'entérovirus 71 en médiant l'activité du site d'entrée interne du ribosome (IRES) de la région 5' non traduite (5'-UTR) virale.
• Localisation subcellulaire : S'associe à la membrane du réticulum endoplasmique et à la membrane externe des mitochondries.
• Modifications post-traductionnelles : Soumise à la phosphorylation et à la conjuguaison de type ubiquitine (ubiquitination).
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes de transcrits.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 375-674 de PPP1R15A humaine, couvrant une région C-terminale. L'anticorps polyclonal résultant peut reconnaître plusieurs isoformes ou formes modifiées.
• Pour le Western blot (WB), une bande autour de 73 kDa est attendue ; des bandes supplémentaires peuvent apparaître en raison de modifications post-traductionnelles ou d'un épissage alternatif. Un prétraitement des échantillons avec des inhibiteurs de phosphatases peut aider à préserver les signaux dépendants de la phosphorylation.
• En IF/ICC, considérez que GADD34 est localisée au RE et aux mitochondries ; une co-coloration avec des marqueurs d'organites peut aider à la vérification. Une perméabilisation avec des détergents (par exemple, 0,1 % Triton X-100) est généralement requise.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec les échantillons humains, de souris et de rat. Validez dans votre système modèle spécifique et incluez des témoins positifs et négatifs appropriés (par exemple, cellules induites par le stress vs non traitées).
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation de l'antigène de revêtement et des conditions de détection ; l'immunogène recombinant peut servir de témoin positif.

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