Anticorps polyclonal de lapin anti-PPM1A pour WB, IF/ICC, ELISA - P35813

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PPM1A

• Le PPM1A (Protéine phosphatase 1A), également connu sous le nom de PP2Cα ou PP2CA, est une phosphatase sérine/thréonine codée par le gène PPM1A chez l'homme. Il appartient à la famille PP2C des phosphatases protéiques dépendantes des métaux.
• Il fonctionne comme une enzyme à large spécificité qui régule négativement la signalisation TGF-bêta en déphosphorylant SMAD2 et SMAD3, entraînant leur dissociation de SMAD4 et leur export nucléaire, mettant ainsi fin au signal.
• Le PPM1A joue un rôle critique dans l'atténuation de l'activation de NF-kappa-B médiée par le TNF en déphosphorylant et inactivant la kinase IKBKB/IKKβ.
• Il déphosphoryle également les sous-unités AMPK PRKAA1 et PRKAA2, ce qui l'implique dans les voies de l'homéostasie énergétique.
• De manière subcellulaire, le PPM1A se trouve dans le noyau, le cytoplasme, le cytosol et les compartiments associés à la membrane, ce qui est cohérent avec ses rôles de signalisation diversifiés.
• La protéine subit un épissage alternatif, est myristoylée et est elle-même phosphorylée. Elle nécessite des ions magnésium ou manganèse comme cofacteurs pour son activité catalytique.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 161-370) du PPM1A humain, ce qui peut conférer une spécificité pour l'isoforme canonique PP2Cα ; vérifiez les performances dans le système d'échantillonnage pertinent.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 42 kDa ; envisagez de charger des témoins positifs appropriés (par exemple, des lysats HeLa ou HEK293) et d'optimiser les conditions de blocage.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, les méthodes de perméabilisation et de fixation peuvent influencer la détection des pools nucléaires et cytoplasmiques ; validez les marqueurs de co-localisation.
• Lorsqu'il est utilisé en ELISA, l'anticorps peut convenir à la fois comme réagent de capture et de détection ; effectuez une croix-titration pour déterminer les concentrations de travail optimales.
• Comme la réactivité croisée est confirmée pour l'humain, la souris et le rat, le signal spécifique à l'espèce doit être validé avec des extraits de tissus endogènes ou des lignées cellulaires.

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