Anticorps polyclonal Anti-PPAT pour WB, IF/ICC, ELISA - Q06203

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PPAT

• Le PPAT, également connu sous le nom de glutamine phosphoribosylpyrophosphate amidotransférase (GPAT), est l'enzyme responsable de la catalyse de la première étape engagée de la biosynthèse de novo des purines.
• Il convertit le phosphoribosylpyrophosphate (PRPP) et la glutamine en phosphoribosylamine, un précurseur critique pour la synthèse des nucléotides puriques.
• L'enzyme contient un cluster fer-soufre 4Fe-4S et nécessite du magnésium comme cofacteur pour son activité catalytique.
• Le PPAT est soumis à une régulation allostérique et à une acétylation post-traductionnelle, qui modulent son activité en réponse aux besoins cellulaires en nucléotides.
• Son motif d'expression ubiquitaire reflète le rôle d'entretien de la biosynthèse des purines dans tous les tissus.
• Avec un poids moléculaire d'environ 57 kDa (57,4 kDa prédit à partir de la séquence), le PPAT est une cible courante dans les études protéomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, une plage de dilution initiale recommandée est de 1:500 à 1:2000 ; l'optimisation est essentielle pour obtenir des signaux spécifiques et clairs.
• Des lysats de contrôle positif peuvent être préparés à partir de lignées cellulaires largement disponibles (par exemple, HeLa, HEK293) ou de tissus de souris/rat, compte tenu de l'expression ubiquitaire du PPAT.
• En immunofluorescence/ICC, les protocoles de fixation et de perméabilisation appropriés doivent être testés pour assurer l'accessibilité de l'anticorps à la cible.
• Lors de l'utilisation pour ELISA, envisagez de le coupler avec un anticorps de détection apparié et validez dans la matrice d'échantillon pertinente.
• Une réactivité croisée avec le PPAT de souris et de rat a été observée ; cependant, une validation individuelle dans le système expérimental spécifique est recommandée.

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