Anticorps polyclonal de lapin anti-POLR3K pour WB, ELISA - Q9Y2Y1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la POLR3K

• La sous-unité RPC10 de l'ARN polymérase III dirigée par l'ADN (également appelée POLR3K, RPC10, RPC11, RPC12.5) est un composant central de l'ARN polymérase III (Pol III) (PubMed:20413673, PubMed:30584594, PubMed:33335104).
  Références associées : PMID:20413673, PMID:30584594, PMID:33335104

• La Pol III synthétise les petits ARN non codants et joue un rôle crucial dans la fidélité de la transcription en médiant la correction d'épreuve et le clivage des nucléotides mal incorporés (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Références associées : PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• Lors de l'atteinte du signal de terminaison poly(dT), la POLR3K induit l'ouverture du clamp de la Pol III et la terminaison de la transcription (PubMed:33335104, PubMed:33558764, PubMed:33558766).
  Références associées : PMID:33335104, PMID:33558764, PMID:33558766

• La POLR3K agit comme un capteur d'ADN nucléaire et cytosolique impliqué dans la réponse immunitaire innée ; elle détecte l'ADN double brin non-soi provenant de bactéries intracellulaires et de virus à ADN, ce qui conduit à sa transcription en ARN double brin qui déclenche les voies de l'interféron de type I et de NF-kappa-B via RIG-I (PubMed:19609254, PubMed:19631370).
  Références associées : PMID:19609254, PMID:19631370

• Sa localisation subcellulaire est majoritairement nucléaire.

• Elle contient des motifs à doigts de zinc et est une protéine liant les métaux, essentiel pour son activité catalytique.

• Les mutations du gène POLR3K sont associées à des leucodystrophies et à la neurodégénérescence, ce qui souligne son importance pour la santé neurologique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-108 de la POLR3K humaine (NP_057394.3), ce qui englobe la protéine entière. Cette conception devrait produire des anticorps capables de reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées, compatible avec les applications WB et ELISA.
• Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des lysats de cellules humaines (par exemple HeLa, HEK293) comme contrôles positifs. Le poids moléculaire prédit est de 12 kDa, mais les niveaux d'expression endogène peuvent varier ; l'optimisation de la dilution de l'anticorps primaire et des conditions d'incubation est recommandée.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, validez l'anticorps avec l'immunogène ou le peptide pour établir une courbe d'étalonnage. La réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée, il faut donc confirmer la spécificité dans votre système modèle.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut survenir ; nous recommandons d'inclure des contrôles internes et de réaliser une validation spécifique du lot pour les expériences critiques.

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