Anticorps polyclonal anti-POLR2D pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - O15514

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de POLR2D

• POLR2D, également connue sous les noms RPB4, RPB16 ou sous-unité D de l’ARN polymérase II dirigée par l’ADN, est une sous-unité centrale de l’ARN polymérase II (Pol II), responsable de la synthèse des précurseurs d’ARNm et des ARN non codants.
• Elle forme un sous-complexe stable avec POLR2G/RPB7, qui se lie à une poche spécifique formée par les grandes sous-unités RPB1, RPB2 et RPB6 à la base de l’élément pince de Pol II.
• Le sous-complexe POLR2D/RPB4-POLR2G/RPB7 verrouille la pince dans une conformation fermée via POLR2G/RPB7, empêchant l’ADN double brin d’entrer dans la fente du site actif et régulant ainsi l’initiation de la transcription.
• Ce sous-complexe possède également une activité de liaison à l’ADN simple brin et à l’ARN, contribuant à la processivité de la polymérase et à la stabilisation des transcrits.
• POLR2D se localise exclusivement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la transcription dirigée par l’ADN.
• Selon UniProt, cette protéine fait partie du protéome de référence et a été identifiée par des études de protéomique et de structure tridimensionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène est une protéine de fusion recombinante couvrant les acides aminés 1-142, ce qui correspond à la séquence complète de POLR2D. Cette conception devrait assurer une haute spécificité pour la protéine native.
• Compte tenu de la forte identité de séquence entre les POLR2D humaine et murine, l’anticorps devrait présenter une réaction croisée fiable dans les échantillons de souris, comme le confirme la validation du fournisseur.
• La détection par Western blot (WB) devrait révéler une bande nette d’environ 16 kDa ; utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés pour confirmer la taille.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), prévoir un marquage exclusivement nucléaire ; effectuer un contre-marquage au DAPI pour confirmer la colocalisation.
• Dans les expériences d’immunoprécipitation (IP), l’anticorps peut précipiter le sous-complexe POLR2D–POLR2G, permettant l’analyse des interactions entre les sous-unités de Pol II.

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