Anticorps polyclonal de lapin anti-podoplanine pour WB, IHC-P, ELISA - Q86YL7

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la podoplanine

• La podoplanine (PDPN, également connue sous les noms d'Aggrus, GP36 et T1A) est une glycoprotéine transmembranaire de type I dotée de domaines extracellulaire, transmembranaire et cytoplasmique. Elle subit un épissage alternatif et est fortement sialylée.
• Par sa liaison à CLEC1B, la podoplanine déclenche l'activation et l'agrégation des plaquettes, processus essentiel à la séparation des vaisseaux sanguins et lymphatiques (PubMed:14522983, PubMed:15231832, PubMed:17222411). L'interaction avec CD9 atténue cette agrégation (PubMed:18541721). Références associées : PMID:14522983 PMID:15231832 PMID:17222411 PMID:18541721
• L'interaction avec MSN ou EZR favorise la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT), entraînant la phosphorylation d'ERZ et l'activation de RHOA, ce qui améliore la migration et l'invasivité cellulaires (PubMed:17046996, PubMed:21376833). Références associées : PMID:17046996 PMID:21376833
• La liaison de la podoplanine à CD44 favorise la migration cellulaire directionnelle dans les cellules épithéliales et tumorales (PubMed:20962267). Elle contrôle également la stabilité des invadopodes et la dégradation de la matrice extracellulaire par l'intermédiaire de la voie RHOC-ROCK-LIMK-CFL1 (PubMed:25486435). Références associées : PMID:20962267 PMID:25486435
• Dans les ganglions lymphatiques, la podoplanine régule l'adhésion et la contractilité des cellules réticulaires fibroblastiques par l'intermédiaire des protéines ERM et de l'activation de MYL9 ; l'engagement de CLEC1B induit une relaxation (par similarité).
• La podoplanine se localise principalement au niveau de la membrane plasmique et est enrichie dans les projections membranaires : lamellipodes, filopodes, microvillosités, ondulations membranaires et invadopodes. Elle est également transportée vers les radeaux membranaires et présente une polarité apicale/basolatérale.
• Elle est fortement exprimée dans le placenta, les poumons, les muscles squelettiques et le cerveau ; son expression est augmentée dans les tumeurs colorectales et certains carcinomes épidermoïdes de la cavité buccale.
• Dans les kératinocytes, l'expression de la podoplanine entraîne une morphologie allongée, une réorganisation du cytosquelette d'actine, une motilité accrue et une diminution de l'adhésion cellulaire (PubMed:15515019). Références associées : PMID:15515019

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 23-131, une région située dans le domaine extracellulaire ; cette conception cible probablement des épitopes accessibles dans des conditions natives et dénaturées, ce qui permet des applications en WB et IHC-P.
• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est d'environ 17 kDa ; toutefois, une O-glycosylation et une sialylation importantes peuvent faire apparaître des bandes à 36-44 kDa ou davantage dans des conditions réductrices. Validez les résultats à l'aide de contrôles positifs appropriés, tels que des lysats de poumon ou de placenta.
• Pour l'IHC-P, envisagez une récupération antigénique et validez la coloration sur des tissus positifs connus (par exemple, des coupes de placenta, de poumon ou de tumeur), avec des contrôles négatifs appropriés.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été indiquée ; vérifiez toutefois l'homologie des séquences et les tailles de bandes attendues chez les différentes espèces avant toute utilisation dans des expériences multi-espèces.
• Pour l'ELISA, l'immunogène recombinant peut servir de standard de capture ; testez les conditions de revêtement et assurez-vous de la compatibilité de l'anticorps de détection.

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