Anticorps polyclonal de lapin anti-PNKP pour WB - Q96T60

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PNKP

• La PNKP est une enzyme bifonctionnelle qui agit à la fois comme une ADN 3'-phosphatase et une 5'-kinase, essentielle à la réparation des cassures de brins d'ADN. Références associées : PMID:10446192, PMID:10446193
• Elle fonctionne dans deux voies majeures de réparation de l'ADN : la jonction d'extrémités non homologues (NHEJ) et la réparation par excision de bases (BER), en traitant les extrémités d'ADN endommagées pour la ligature. Références associées : PMID:10446192, PMID:10446193, PMID:15385968
• La PNKP est localisée dans le noyau et s'associe aux chromosomes, ce qui est cohérent avec son rôle dans la réparation de l'ADN.
• La protéine est exprimée dans de nombreux tissus, avec l'expression la plus élevée dans la rate et les testicules, et la plus faible dans l'intestin grêle ; elle est également présente à des niveaux plus élevés dans le pancréas, le cœur et les reins. Références associées : PMID:10446192, PMID:10446193
• La PNKP appartient à la famille des enzymes de réparation de l'ADN et est également connue sous le nom d'ADN 5'-kinase/3'-phosphatase ou polynucléotide kinase-3'-phosphatase.
• Elle contient des domaines fonctionnels clés pour la liaison à l'ATP et l'activité catalytique, et subit des modifications post-traductionnelles régulatrices, notamment l'acétylation et la phosphorylation.
• Des mutations dans le gène PNKP sont associées à des troubles neurologiques tels que l'ataxie-apraxie oculomotrice 4 (AOA4), la microcéphalie avec crises (MCSZ) et la maladie de Charcot-Marie-Tooth de type 2B2 (CMT2B2), soulignant son rôle critique dans la réparation de l'ADN neuronal.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 60-320 de la PNKP humaine (NP_009185.2), couvrant la région catalytique centrale ; cette séquence est hautement conservée entre l'humain, la souris et le rat, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 57 kDa est attendue. Utilisez un pourcentage de gel et un protocole de transfert sur membrane appropriés pour résoudre cette protéine.
• La PNKP est une protéine nucléaire ; en immunofluorescence (IF/ICC) ou en immunohistochimie (IHC-P), attendez-vous à une coloration nucléaire. Incluez des témoins appropriés et des étapes de démasquage antigénique pour de meilleurs résultats.
• Confirmez les niveaux d'expression dans votre système d'échantillonnage, car la PNKP est exprimée de manière large mais avec des variations spécifiques aux tissus (élevée dans la rate/les testicules, faible dans l'intestin).

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