Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-PMS2 pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - P54278

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PMS2

• PMS2 (homologue 2 de la protéine PMS1) est un composant central du système de réparation des mésappariements de l'ADN (MMR) post-réplicatif, où elle hétérodimérise avec MLH1 pour former le complexe MutL alpha. Références associées : PMID:30653781 PMID:35189042
• Le recrutement de MutL alpha au mésappariement est médié par MutS alpha (MSH2-MSH6) ou MutS bêta (MSH2-MSH3), et l'assemblage du complexe ternaire avec RFC et PCNA active l'activité endonucléase latente de PMS2, introduisant des cassures simple brin près du mésappariement.
• Le mécanisme de discrimination des brins repose sur la méthylation de l'ADN : le brin nouvellement synthétisé et non méthylé est préférentiellement coupé, assurant la correction des erreurs de réplication.
• En tant qu'endonucléase, PMS2 génère des points d'entrée pour l'exonucléase EXO1, qui excise le brin contenant l'erreur, et elle interagit également physiquement avec les sous-unités du chargeur de pince de l'ADN polymérase III, suggérant un rôle dans le recrutement de la polymérase réplicative pour la synthèse de réparation.
• Au-delà de la MMR, PMS2 est impliquée dans la signalisation des dommages à l'ADN, déclenchant l'arrêt du cycle cellulaire ou l'apoptose en réponse à des lésions étendues de l'ADN, agissant ainsi comme un suppresseur de tumeur.
• PMS2 possède une activité ATPase intrinsèque ; cependant, l'hydrolyse de l'ATP peut ne pas être essentielle pour une réparation efficace des mésappariements dans certaines conditions. Références associées : PMID:35189042
• La protéine se localise exclusivement dans le noyau et est phosphorylée sur plusieurs sites. Les mutations de PMS2 sont associées au cancer colorectal héréditaire sans polypose (syndrome de Lynch) et à d'autres tumeurs malignes.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 390–670 dans la région C-terminale de la PMS2 humaine, qui contient le site actif de l'endonucléase ; envisagez de valider la réactivité dans des échantillons exprimant des variants de PMS2 pleine longueur ou tronqués.
• Pour le Western blot (WB), attendez-vous à un bande d'environ 96 kDa ; utilisez un contrôle positif tel que des lysats cellulaires HeLa ou HEK293, et incluez des extraits nucléaires pour améliorer le signal.
• En immunofluorescence (IF/ICC), PMS2 montre un motif de coloration nucléaire ; une co-coloration avec un marqueur nucléaire est recommandée pour confirmer la localisation.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), l'anticorps peut précipiter le complexe MutL alpha (MLH1-PMS2) ; validez la co-précipitation dans les lignées cellulaires pertinentes.
• Une réactivité croisée avec la PMS2 de souris est rapportée ; pour les études sur souris, vérifiez les performances dans le tissu ou le type cellulaire prévu.
• Optimisez les dilutions d'anticorps pour chaque application et système d'échantillon, car la réactivité peut varier en fonction des niveaux d'expression et des modifications post-traductionnelles.

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