Anticorps polyclonal de lapin anti-PML+RARA pour IF/ICC et ELISA - P29590 / P10276

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PML+RARA

• La protéine PML (protéine de la leucémie promyélocytaire, TRIM19) constitue l’élément structural des corps nucléaires PML, agissant comme une ligase E3 de type RING pour SUMO et participant à la suppression tumorale, à la régulation transcriptionnelle, à l’apoptose, à la sénescence et à la défense antivirale. Références associées : PMID:11500381, PMID:11575918, PMID:18391071, PMID:20972456, PMID:28250117
• Dans la leucémie promyélocytaire aiguë (LPA), la translocation chromosomique t(15;17) crée l’oncoprotéine de fusion PML-RARA, perturbant la formation normale des corps nucléaires PML et la signalisation de l’acide rétinoïque.
• PML présente une forte activité antivirale contre un large éventail de virus à ADN et à ARN, souvent en séquestrant les composants viraux au sein des corps nucléaires PML ; les isoformes PML-4 et PML-6 présentent une forte activité de ligase SUMO. Références associées : PMID:20972456, PMID:28250117
• PML se localise principalement dans le noyau (nucléoplasme, corps PML, nucléole), mais il existe également des isoformes cytoplasmiques pouvant s’associer au réticulum endoplasmique et aux membranes des endosomes précoces.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles essentielles, notamment la SUMOylation, la phosphorylation et l’acétylation, qui régulent sa dynamique subcellulaire et ses interactions.
• PML est considérée comme un suppresseur de tumeur et un proto-oncogène, selon le contexte de l’isoforme, et intervient dans la réponse aux dommages de l’ADN, la régulation de la télomérase et les rythmes circadiens.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L’immunogène couvre les résidus 500-600 de PML et 1-100 de RARA, ce qui suggère une spécificité pour la jonction de fusion ; il peut être pertinent de valider la réactivité avec PML ou RARA de type sauvage individuellement.
• Pour l’IF/ICC, envisagez d’utiliser des lignées cellulaires dérivées de LPA (par exemple NB4) exprimant la fusion PML-RARA ; un motif nucléaire en microspeckles indique une perturbation des corps PML normaux.
• En ELISA, il est recommandé de titrer l’anticorps contre la protéine PML-RARA recombinante ou des antigènes peptidiques afin de déterminer les concentrations de travail optimales.
• Une réactivité croisée avec des échantillons de rat est rapportée, mais un alignement des séquences de la région immunogène de PML et RARA chez le rat est conseillé afin de confirmer la conservation de l’épitope.

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