Anticorps monoclonal Anti-PLOD3/LH3 pour WB, ELISA - O60568

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PLOD3/LH3

• PLOD3 (également connu sous le nom de LH3) est une enzyme multifonctionnelle qui catalyse les modifications post-traductionnelles des résidus de lysine dans le procollagène, notamment l'hydroxylation, la galactosylation et la glucosylation, qui sont essentielles pour la stabilité du collagène et l'intégrité de la membrane basale. Références associées : PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• Il catalyse de manière redondante la formation d'hydroxylysine dans les motifs -Xaa-Lys-Gly- des collagènes. Références associées : PMID:11956192 PMID:12475640 PMID:18298658
• PLOD3 transfère également du galactose sur les résidus d'hydroxylysine, formant de l'hydroxylysine galactosylée. Références associées : PMID:12475640 PMID:18298658 PMID:18834968
• Son rôle essentiel réside dans l'activité glucosyltransférase ultérieure, produisant des résidus 1,2-glucosylgalactosyl-5-hydroxylysine. Références associées : PMID:10934207 PMID:11896059 PMID:11956192
• PLOD3 est nécessaire pour la biosynthèse et la sécrétion normales des collagènes de type IV et la formation de la membrane basale. Références associées : PMID:18834968
• Il se localise principalement au réticulum endoplasmique rugueux, à la lumière du RE et à la membrane du RE, et peut être sécrété dans l'espace extracellulaire.
• La protéine est exprimée de manière ubiquitaire, avec des niveaux relativement plus élevés dans le cœur, le placenta et le pancréas, et plus faibles dans le poumon, le foie et le muscle squelettique. Références associées : PMID:9724729 PMID:9582318
• PLOD3 est un membre glycosylé, liant aux métaux (fer et manganèse) des familles des dioxygénases et des glycosyltransférases, et des mutations sont associées à des maladies.
• Il hydroxyle et glycosyle également le domaine de type collagène de MBL1, élargissant sa spécificité de substrat. Références associées : PMID:25419660

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 25-306 du PLOD3 humain, couvrant une région probablement accessible à la liaison de l'anticorps. Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des conditions réductrices pour détecter la bande à 85kDa, et validez avec des lysats de lignées cellulaires humaines et murines connues pour exprimer le PLOD3 (par exemple, cœur, placenta).
• L'anticorps est validé pour ELISA ; pour les applications ELISA sandwich, le couplage avec un autre clone reconnaissant un épitope distinct peut améliorer la sensibilité. La réactivité croisée avec la souris suggère une utilité dans les études sur modèles rongeurs, mais la réactivité croisée avec d'autres espèces doit être vérifiée expérimentalement.
• Puisque PLOD3 est une protéine résidente du RE et sécrétée, la préparation des échantillons pour WB peut bénéficier d'une fractionnement sous-cellulaire ou de stratégies d'enrichissement, en particulier pour les échantillons avec une faible expression endogène.

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