Anticorps polyclonal de lapin Anti-PLOD2/LH2 pour WB et ELISA - O00469

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PLOD2/LH2

• Le gène PLOD2 code pour la procollagène-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygénase 2, également appelée lysyl hydroxylase 2 (LH2), une enzyme appartenant à la famille des dioxygénases dépendantes du 2-oxoglutarate.
• L'enzyme catalyse l'hydroxylation des résidus de lysine dans les séquences Xaa-Lys-Gly du collagène, formant l'hydroxylysine. Ces résidus modifiés sont essentiels pour la fixation des unités glucidiques et la stabilité des réticulations intermoléculaires du collagène.
• PLOD2 est localisée sur la membrane du réticulum endoplasmique rugueux et dans le cytoplasme, où elle exerce sa fonction enzymatique lors du traitement du procollagène.
• Deux isoformes principales existent suite à un épissage alternatif ; l'isoforme 2 est exprimée sélectivement dans la peau, le poumon, la dure-mère et l'aorte, tandis que les deux isoformes sont détectées de manière généralisée dans les autres tissus.
• La protéine est fortement exprimée dans le pancréas et le muscle, ce qui est cohérent avec le fort turn-over du collagène dans ces tissus.
• En tant que membre de la famille génique PLOD, les mutations de PLOD2 sont associées à l'ostéogenèse imparfaite et à d'autres maladies du tissu conjonctif, ce qui met en évidence son rôle dans la biosynthèse et l'intégrité du collagène.
• L'enzyme requiert du fer et de la vitamine C comme cofacteurs pour son activité dioxygénase, et elle subit des modifications post-traductionnelles incluant la glycosylation et la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 85 kDa ; pensez à déposer un marqueur de poids moléculaire adapté et à vérifier la migration de la bande sur les lysats de l'espèce étudiée.
• L'immunogène correspond aux acides aminés 260–380, une région qui peut être conservée chez l'homme, la souris et le rat ; néanmoins, la réactivité croisée doit être validée dans votre système expérimental.
• Les applications ELISA peuvent être réalisées avec la protéine PLOD2 recombinante ou des lysats cellulaires ; il est recommandé de réaliser une titration de l'anticorps et d'utiliser des réactifs de détection secondaires adaptés.
• Assurez une préparation d'échantillon adaptée pour les protéines membranaires en utilisant des détergents doux pour conserver la conformation native, car PLOD2 est associée à la membrane du réticulum endoplasmique rugueux.
• L'inclusion de lysats contrôles positifs issus de pancréas ou de muscle (forte expression endogène) peut aider à optimiser les conditions de détection.

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