Anticorps polyclonal (pAb) de lapin anti-PLOD1 pour WB et ELISA - Q02809

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PLOD1

• PLOD1 code pour la lysyl hydroxylase 1 (LH1), une enzyme de modification du collagène d'environ 84 kDa appartenant à la famille des dioxygénases dépendantes du 2-oxoglutarate, essentielle à la biosynthèse du collagène et à l'intégrité du tissu conjonctif.
• Faisant partie d'un complexe multiprotéique avec P3H3 et P3H4, la PLOD1 catalyse l'hydroxylation des résidus lysine dans les chaînes alpha du collagène au niveau des séquences -Xaa-Lys-Gly-.
  Références associées :
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• Les résidus hydroxylysine résultants servent de sites de fixation pour les unités glucidiques et sont essentiels à la formation de liaisons croisées intermoléculaires stables du collagène, garantissant la résistance mécanique des tissus.
• La PLOD1 est ancrée à la membrane du réticulum endoplasmique rugueux, où elle hydroxyle la lysine de manière co-traductionnelle sur les chaînes de procollagène naissantes.
• L'enzyme nécessite du fer et de la vitamine C comme cofacteurs et est soumise à une N-glycosylation ; les mutations du gène PLOD1 provoquent le syndrome d'Ehlers-Danlos de type VI, une maladie grave du tissu conjonctif.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, modulant potentiellement l'activité enzymatique ou la localisation de manière spécifique au tissu.
• L'expression de la cible est importante dans les cellules productrices de collagène telles que les ostéoblastes, les chondrocytes et les fibroblastes dermiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (acides aminés 19–295) englobe une région hautement conservée chez l'humain, la souris et le rat pour la PLOD1, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée indiquée ; une vérification de l'alignement des séquences est recommandée pour les autres espèces.
• Pour le Western blot, une bande proche de 84 kDa est attendue ; la PLOD1 endogène peut être détectable dans les lysats de lignées fibroblastiques (par ex. MRC-5, NIH/3T3) ou dans les tissus riches en collagène (peau, os, tendon).
• Envisagez d'optimiser la dilution de l'anticorps et les conditions de détection pour l'ELISA, en utilisant une protéine PLOD1 recombinante ou des peptides dérivés du collagène comme antigènes de revêtement.
• L'anticorps est polyclonal et peut présenter une sensibilité et une spécificité variables ; une validation dans le système d'échantillon pertinent est conseillée avant toute application quantitative.

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