Anticorps Polyclonal de Lapin Anti-PLK1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P53350

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du PLK1

• Sérine/thréonine-protéine kinase qui exerce plusieurs fonctions essentielles tout au long de la phase M, y compris la régulation de la maturation des centrosomes, de l'assemblage du fuseau, du retrait des cohésines, de l'inactivation des inhibiteurs de l'APC/C, et la régulation de la sortie mitotique et de la cytocinèse. Références associées : PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Phosphorylate un large éventail de substrats (ex : BORA, BUB1B, CCNB1, CDC25C, FOXM1) en reconnaissant des motifs pré-phosphorylés via ses domaines de boîte POLO, amplifiant ainsi les signaux régulateurs mitotiques. Références associées : PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• Clé pour les fonctions des centrosomes et l'assemblage du fuseau bipolaire ; phosphoryle KIZ, NEDD1 et NINL pour favoriser le recrutement du complexe de l'anneau de gamma-tubuline et l'organisation des centrosomes. Références associées : PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• Régule la sortie mitotique et la cytocinèse via la phosphorylation de CEP55, ECT2, KIF20A/MKLP2, PRC1 et RACGAP1, créant des sites d'amarrage sur le fuseau central pour le facteur d'échange de Rho GTP ECT2 et la formation du sillon de clivage. Références associées : PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• Orchestre la transition G2/M en phosphorylant CDC25C, WEE1, PKMYT1 et CCNB1, conduisant à l'activation de CDK1 ; améliore également l'activité transcriptionnelle de FOXM1. Références associées : PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• Impliqué dans les fonctions des kinétochores et la cohésion des chromatides sœurs ; phosphoryle BUB1B, FBXO5 et STAG2 pour réguler l'attachement des kinétochores, le point de contrôle du fuseau et la dissociation des cohésines. Références associées : PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:17617734, PMID:18331714
• Présente une localisation sous-cellulaire dynamique : noyau, centrosome, kinétochore, fuseau et corps intermédiaire. Fortement exprimé dans le placenta et le côlon.
• Contribue également à la récupération après des dommages à l'ADN, à la désintégration de l'enveloppe nucléaire, à la réponse au choc thermique et à la biogenèse des cils via la phosphorylation de diverses cibles (ex : DCTN1, DZIP1, HSF1). Références associées : PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:20679239, PMID:15661742, PMID:18794143, PMID:27979967, PMID:37440612, PMID:37674080

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène englobe les acides aminés 304–603, couvrant les domaines de boîte POLO C-terminaux ; cette région est hautement conservée, ce qui soutient la réactivité croisée avec le PLK1 de souris et de rat.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à environ 68 kDa ; validez avec des témoins positifs et négatifs appropriés, et envisagez d'utiliser des lignées cellulaires synchronisées en mitose pour une détection optimale.
• En IHC-P et IF/ICC, optimisez les conditions de fixation/perméabilisation ; le PLK1 présente une localisation dynamique (centrosomes, kinétochores, corps intermédiaire) qui peut nécessiter une perméabilisation douce pour préserver l'antigénicité.
• Puisqu'il s'agit d'un anticorps polyclonal, la titration est essentielle pour chaque application ; commencez par 1:500–1:2000 pour le WB et ajustez en fonction de l'abondance de la cible et de la méthode de détection.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; le couplage avec un anticorps monoclonal anti-PLK1 pourrait améliorer la spécificité dans les dosages sandwich.
• Vérifiez la réactivité croisée dans votre système modèle ; bien qu'il soit réactif avec l'humain, la souris et le rat, les niveaux d'expression de la cible varient selon les tissus et les lignées cellulaires.

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