Anticorps monoclonal de lapin anti-PLC gamma 1 (PLCG1) pour WB, ELISA - P19174

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PLCG1

• Le gène PLCG1 code pour la phospholipase C gamma-1, une enzyme clé qui hydrolyse le phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PIP2) pour générer les seconds messagers diacylglycérol (DAG) et inositol 1,4,5-trisphosphate (IP3), régulant ainsi la signalisation calcique intracellulaire et la voie de la protéine kinase C.
• La protéine est activée en aval des récepteurs tyrosine kinases (ex : PDGFRA, PDGFRB, EGFR, FGFRs) et joue un rôle critique dans la transduction du signal médiée par les facteurs de croissance, reliant les récepteurs de surface cellulaire aux cascades de signalisation en aval.
• PLCG1 participe à la réorganisation du cytosquelette d'actine et à la migration cellulaire, et se localise dans des structures cellulaires dynamiques incluant les lamellipodes et les ondulations membranaires. Références associées : PMID:17229814
• En plus de son activité lipasique, PLCG1 fonctionne comme facteur d'échange de nucléotides guaniques (GEF) pour la dynamine-1 (DNM1), facilitant la dissociation du GDP et améliorant l'endocytose dépendante de DNM1.
• La protéine contient des domaines régulateurs SH2 et SH3 qui médient les interactions avec les protéines contenant de la phosphotyrosine et les motifs riches en proline, contribuant à son assemblage au sein de complexes de signalisation.
• Des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation (sur résidus tyrosine et sérine) et l'acétylation modulent son activité et ses interactions ; l'épissage alternatif génère plusieurs isoformes.
• PLCG1 est exprimée de manière ubiquitaire et est impliquée dans divers contextes pathologiques, notamment les cancers et les maladies génétiques, où une signalisation anormale via cette voie entraîne des processus pathologiques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond à une région entre les acides aminés 710–832 de la PLCG1 humaine, située dans le domaine catalytique ; cette région est très conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires entiers de lignées cellulaires humaines courantes (ex : HeLa, Jurkat, A431), où la PLCG1 est exprimée endogéniquement à des niveaux modérés ; une bande d'environ 149 kDa est attendue.
• Lors du développement d'un test ELISA, validez l'anticorps dans les formats direct et de capture en utilisant une protéine recombinante ou la cible native ; notez que la réactivité de l'anticorps peut être influencée par la conformation de la protéine et la préparation de l'échantillon.
• Optimisez les conditions de blocage et de lavage pour minimiser le bruit de fond, l'anticorps étant monoclonal de lapin ; il est recommandé de réaliser des expériences de titrage pour chaque nouvelle application.

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