Anticorps Monoclonaux Anti-PKR/EIF2AK2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P19525

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de PKR/EIF2AK2

• PKR/EIF2AK2 est une sérine/thréonine-protéine kinase dépendante de l'ARN double brin induite par l'interféron, qui présente également une activité tyrosine-protéine kinase, jouant un rôle central dans la réponse immunitaire innée contre les infections virales (PubMed:18835251, PubMed:19189853, PubMed:19507191). Références associées : PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191
• Elle phosphoryle la sous-unité α du facteur d'initiation de la traduction eucaryote 2 (EIF2S1/eIF-2α) lors de son activation par l'ARNdb viral, conduisant à une inhibition globale de la synthèse protéique et à une traduction préférentielle des ARNm de réponse au stress tels que ATF4, supprimant ainsi la réplication virale (PubMed:19189853, PubMed:21123651, PubMed:22948139). Références associées : PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139
• Présente une activité antivirale contre un large spectre de virus à ADN et à ARN, y compris le virus de l'hépatite C (VHC), le virus de l'hépatite B (VHB), le virus de la rougeole (MV) et le virus de l'herpès simplex 1 (HSV-1) (PubMed:11836380, PubMed:19189853, PubMed:19840259). Références associées : PMID:11836380 PMID:19189853 PMID:19840259
• Au-delà du contrôle traductionnel, PKR module diverses voies de signalisation (p38 MAP kinase, NF-κB, signalisation de l'insuline) et des facteurs de transcription (JUN, STAT1, IRF1) pour réguler l'expression des gènes des cytokines pro-inflammatoires et des interférons (PubMed:22948139, PubMed:23084476, PubMed:23372823). Références associées : PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et la région périnucléaire, avec une expression tissulaire spécifique élevée dans le thymus, la rate et la moelle osseuse ; des niveaux élevés sont observés dans les carcinomes du sein et du côlon, corrélés avec la progression tumorale.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination (liaison isopeptidique), contribuant à sa régulation sous le stress et les stimuli immunitaires.
• Contient des domaines de liaison à l'ARN et des motifs de kinase, le classant comme une transférase liant l'ATP avec une double activité sérine/thréonine et tyrosine kinase, essentielle pour la défense antivirale et la dynamique des granules de stress.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène correspond à un peptide synthétique issu des acides aminés 450-551, une région située dans le domaine kinase ; à prendre en compte lors de l'évaluation de la spécificité de l'épitope et de la reconnaissance potentielle des isoformes.
• Cet anticorps est validé pour le Western blotting (WB), l'immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC) et l'ELISA ; les dilutions de travail optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque application et type d'échantillon.
• Comme PKR est une protéine inductible par l'interféron, un prétraitement des cellules avec de l'interféron de type I ou des mimiques d'infection virale peut améliorer la détection dans certains modèles expérimentaux.
• Le poids moléculaire prédit de PKR est de 62 kDa, mais les modifications post-traductionnelles (ex. phosphorylation) peuvent provoquer de légers décalages ; inclure des témoins positifs appropriés (ex. lysats de HeLa ou A549 traités à l'interféron).
• La réactivité croisée est confirmée pour les échantillons humains ; pour d'autres espèces, un alignement de séquences est recommandé avant utilisation, car la réactivité croisée n'est pas garantie.

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