Anticorps polyclonal de lapin spécifique anti-PKM2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PKM2

• Le PKM2 catalyse l'étape finale limitante de la glycolyse, convertissant le phosphoénolpyruvate en pyruvate avec production d'ATP, et son rapport tétramère-dimère contrôle le basculement entre la production d'énergie et l'approvisionnement en précurseurs biosynthétiques, critique pour la survie des cellules tumorales.
  Références connexes : PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Le PKM2 est l'isoforme embryonnaire à faible activité pyruvate kinase constitutive, nécessitant une activation allostérique par le D-fructose-1,6-bisphosphate (FBP) ; il est remplacé par l'isoforme PKM1 à haute activité dans la plupart des tissus adultes.
  Références connexes : PMID:18337823, PMID:20847263
• Dans le noyau, le PKM2 fonctionne comme une protéine kinase, phosphorylant STAT3 sur la Tyr-705 et l'histone H3 sur la Thr-11 pour stimuler la transcription de gènes tels que VEGFA et CD274, reliant ainsi le métabolisme à l'expression génique.
  Références connexes : PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661, PMID:33314660
• Le PKM2 favorise la tumorigenèse par co-activation transcriptionnelle avec NF-κB et FOXM1, et participe également aux voies de mort cellulaire indépendantes de la caspase.
  Références connexes : PMID:17308100, PMID:26787900, PMID:33314660
• Le PKM2 subit diverses modifications post-traductionnelles — acétylation, phosphorylation, méthylation, hydroxylation, S-nitrosylation et ubiquitination — qui modulent ses activités métaboliques et non métaboliques.
• Il agit également comme une protéine cytosolique liant l'hormone thyroïdienne (CTHBP) et une protéine interagissant avec Opa (OIP-3), reflétant des rôles multifonctionnels au-delà de la glycolyse.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène se situe dans les acides aminés 380–480 du PKM2 humain, une région qui peut le différencier du variant d'épissage PKM1 ; incluez des témoins PKM1 lors de l'évaluation de la spécificité de l'isoforme.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à ~58kDa ; utilisez des lysats de lignées cellulaires cancéreuses humaines, murines ou de rat (par ex. HeLa, MCF-7) et incluez des témoins positifs et négatifs.
• En immunofluorescence ou ICC, anticipez un marquage cytoplasmique et nucléaire ; optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour préserver les épitopes dans les deux compartiments.
• Pour les applications ELISA, l'immunogène peptidique synthétique peut servir de témoin positif ; envisagez de le coupler avec un anticorps de détection reconnaissant un épitope distinct pour les tests sandwich.

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