Anticorps polyclonal de lapin anti-PKM2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P14618

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKM2

• PKM2 catalyse la dernière étape limitante de la glycolyse, convertissant le phosphoénolpyruvate en pyruvate et générant de l'ATP. Son activité est régulée allostériquement, et l'équilibre entre le tétramère actif et le dimère moins actif contrôle le flux métabolique. Références associées : PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Cette enzyme glycolytique exerce également une fonction secondaire de protéine kinase dans le noyau, phosphorylant STAT3 sur Tyr-705 et l'histone H3 sur Thr-11 pour réguler la transcription. Références associées : PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• PKM2 nucléaire promeut la transcription de VEGFA aux côtés des sous-unités de NF-kB, renforçant l'angiogenèse et induit l'expression de CD274 dans des contextes immunitaires spécifiques. Références associées : PMID:33314660
• PKM2 joue un rôle critique dans la prolifération et la survie des cellules tumorales ; son expression est régulée à la hausse dans de nombreux cancers, ce qui en fait un carrefour métabolique et régulateur clé de la tumorigenèse. Références associées : PMID:18337823, PMID:22901803, PMID:26787900
• La protéine est majoritairement cytoplasmique mais se translocalise dans le noyau en réponse à une signalisation (par exemple, activation d'EGFR) pour exercer ses fonctions non métaboliques.
• PKM2 est spécifiquement exprimé dans les cellules proliférantes, y compris les cellules souches embryonnaires et les cellules cancéreuses, et peut être remplacé par l'isoforme adulte PKM1 dans les tissus différenciés. Références associées : PMID:18337823, PMID:20847263
• Les modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'hydroxylation, ajustent précisément son activité et sa localisation subcellulaire.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 11 à 221 de PKM2 (NP_001193728.1), une région qui s'étend sur le domaine N-terminal. Envisagez de tester une gamme de dilutions d'anticorps (par exemple, 1:500–1:5000 pour WB) et d'optimiser les conditions de blocage pour obtenir le meilleur rapport signal/bruit.
• Pour l'IF/ICC, fixez et perméabilisez correctement les cellules, et validez le profil de coloration par rapport à la distribution subcellulaire connue de PKM2 dans le type cellulaire étudié.
• Lors de la réalisation d'ELISA, incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés pour confirmer la réactivité et la spécificité de l'anticorps.
• En raison de la réactivité croisée avec PKM2 de souris et de rat, l'anticorps peut convenir à la détection de la cible dans des modèles rongeurs ; confirmez cependant cette compatibilité par alignement de séquences et expériences pilotes.

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