Anticorps monoclonal de lapin anti-PKM1/2 PolymAb® pour WB, IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P14618

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PKM1/2

• PKM1/2, codée par le gène PKM, est une pyruvate kinase qui catalyse l'étape finale limitante de la glycolyse, en transférant un groupement phosphoryle du phosphoénolpyruvate (PEP) à l'ADP afin de générer de l'ATP. Références associées : PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Le gène PKM produit deux isoformes principales par épissage alternatif : la PKM2 embryonnaire et associée aux tumeurs, ainsi que la PKM1 spécifique des tissus adultes, qui diffèrent par leur régulation et leur activité. Références associées : PMID:18337823, PMID:20847263
• L'activité de PKM2 est contrôlée par un commutateur allostérique entre un tétramère hautement actif et un dimère presque inactif ; ce changement détermine si le glucose est utilisé pour produire de l'ATP ou détourné vers des voies biosynthétiques, un processus essentiel à la prolifération et à la survie des cellules tumorales. Références associées : PMID:15996096, PMID:1854723, PMID:20847263
• Au-delà de son rôle métabolique cytoplasmique, PKM2 se transloque vers le noyau où elle agit comme une protéine kinase, en phosphorylant des cibles telles que STAT3 (Tyr-705) et l'histone H3 (Thr-11) afin de moduler la transcription, notamment en favorisant l'expression de VEGFA lors de l'angiogenèse. Références associées : PMID:18191611, PMID:21620138, PMID:22056988, PMID:22306293, PMID:22901803, PMID:24120661
• PKM2 est spécifiquement exprimée dans les cellules proliférantes telles que les cellules souches embryonnaires et les cellules cancéreuses, tandis que PKM1 est principalement présente dans les tissus adultes normaux. Références associées : PMID:18337823
• La protéine se localise à la fois dans le cytoplasme et dans le noyau, ce qui concorde avec ses doubles rôles dans le métabolisme et la régulation transcriptionnelle.
• La protéine PKM2 subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la méthylation, la phosphorylation et l'hydroxylation, qui régulent son activité enzymatique, sa localisation et ses fonctions non métaboliques.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour les applications de Western blot et d'immunohistochimie, utilisez des lysats cellulaires ou tissulaires d'origine humaine, murine ou de rat, car l'anticorps présente une large réactivité croisée.
• Compte tenu de la localisation à la fois cytoplasmique et nucléaire de PKM1/2, envisagez des protocoles appropriés de fractionnement ou de co-coloration dans les expériences d'IF/ICC afin de confirmer la distribution subcellulaire.
• Lors de l'évaluation des fonctions spécifiques de PKM2, validez la spécificité de la détection en utilisant des lignées cellulaires déficientes en PKM2 ou une inhibition par siRNA, car l'immunogène couvre une région conservée entre les isoformes.
• Optimisez les dilutions de l'anticorps pour chaque application au moyen d'une série de dilutions, car les concentrations de travail optimales peuvent varier selon les types d'échantillons et les systèmes de détection.

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