Anticorps Polyclonal Anti-PKC zeta pour WB, IF/ICC, ELISA - Q05513

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC zeta

• PKC zeta (nPKC-zeta) est une protéine kinase C atypique, insensible au calcium et au diacylglycérol, qui agit comme une sérine/thréonine-protéine kinase dans l'activation de NF-kappa-B, la signalisation mitogène, la prolifération cellulaire, la polarité cellulaire, la réponse inflammatoire et le maintien de la potentialisation à long terme (LTP).
• En aval de PI3K, PKC zeta active la cascade MEK1-ERK2 indépendamment de RAF1 dans les macrophages et après des stimuli mitogènes. Elle contribue également à l'activation insulinodépendante d'AKT3 et à la translocation de GLUT4 dans les adipocytes, agissant en partie comme adaptateur.
• PKC zeta médie l'activation de NF-kappa-B via des interactions avec SQSTM1/p62, RIPK1 et TRAF6, conduisant à la phosphorylation de IKBKB et à la dégradation de l'inhibiteur de NF-kappa-B. Elle phosphoryle ensuite RELA sur le Ser-311 pour contrecarrer la répression médiée par SETD6.
• Dans la polarité cellulaire, PKC zeta forme un complexe cytoplasmique avec PARD6A et est recrutée par CDC42 pour établir la polarité avec les moteurs à microtubules. Elle stimule la différenciation neuronale avec FEZ1 et est requise pour la LTP de phase tardive dans les synapses hippocampiques CA1, un processus crucial pour la mémoire à long terme.
• PKC zeta phosphoryle VAMP2 in vitro et active LRRK1, qui phosphoryle ensuite les protéines RAB impliquées dans le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:17313651 PMID:36040231
• PKC zeta se localise dans le cytoplasme, les endosomes, les jonctions cellulaires et la membrane. Elle est principalement exprimée dans le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le poumon, le rein et le testicule. Elle contient un domaine à doigt de zinc et un site de liaison à l'ATP, et est soumise à l'épissage alternatif et à la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (acides aminés 476–547), ce qui peut offrir une bonne accessibilité à l'épitope pour la détection de protéines natives et dénaturées.
• Pour le Western blotting, le poids moléculaire prédit est d'environ 68 kDa ; incluez systématiquement des contrôles positifs et négatifs pour confirmer la spécificité.
• En immunofluorescence/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation, car PKC zeta peut se localiser dans de multiples compartiments (cytoplasme, membrane, endosomes, jonctions).
• ELISA peut être utilisé pour la détection quantitative de PKC zeta dans des lysats cellulaires ou des protéines purifiées ; validez avec des étalons connus.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat est attendue ; confirmez la réactivité dans votre système d'échantillon spécifique avant des études à grande échelle.

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