Anti-PKC alpha Lapin PolymAb® pour WB et ELISA - P17252

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PKC alpha

• La protéine kinase C de type alpha (PKCα) est une sérine/thréonine-protéine kinase dépendante du calcium, des phospholipides et du diacylglycérol (DAG), codée par le gène PRKCA. Elle appartient à la famille des protéines kinases C et contient des domaines régulateurs à doigt de zinc et un domaine catalytique kinase.
• En biologie du cancer, la PKCα est fortement exprimée dans les gliomes et les cancers du sein, où elle agit comme un promoteur tumoral et contribue aux phénotypes malins en régulant la prolifération cellulaire, l'apoptose et la migration via des voies telles que MAPK/ERK.
• La PKCα joue des rôles cardiovasculaires critiques : elle module négativement la contractilité myocardique en phosphorylant la troponine T cardiaque (TNNT2), favorise l'hypertrophie cardiaque via la signalisation ERK1/2, et est nécessaire à l'hypertrophie des cardiomyocytes après stimulation par le PMA.
• Dans l'angiogenèse et la fonction plaquettaire, la PKCα médie la prolifération des cellules endothéliales induite par le VEGFA et la formation de tubes, et active l'intégrine plaquettaire αIIbβ3 via la voie RAP1GAP, facilitant l'agrégation plaquettaire induite par le calcium et la formation de thrombus.
• La PKCα phosphoryle des substrats clés en aval : elle phosphoryle le facteur d'échange de guanine CDC42 DOCK8 pour augmenter l'activité de CDC42 lors de la migration des lymphocytes T, phosphoryle KLHL3 pour diminuer son interaction avec WNK4 en réponse à l'angiotensine II, et active LRRK1 impliqué dans le trafic intracellulaire médié par RAB. Références connexes : PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231
• Au niveau subcellulaire, la PKCα se localise dynamiquement dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau, se déplaçant entre les compartiments en réponse à des stimuli. Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et l'acétylation.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des contrôles positifs tels que des lysats de cellules HeLa, MCF-7 ou A431, qui expriment la PKCα endogène. Une gamme de dilution de départ doit être déterminée empiriquement.
• Étant donné que l'immunogène est la protéine recombinante de la PKCα humaine et qu'une réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée, validez l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent pour confirmer la détection spécifique à l'espèce.
• Pour les applications ELISA, évaluez l'appariement avec un anticorps de capture approprié et optimisez les conditions du test ; la protéine recombinante PKCα peut servir d'étalon.
• Les changements conformationnels dépendants de la phosphorylation peuvent influencer la liaison de l'anticorps ; si vous étudiez la PKCα activée, envisagez un prétraitement avec des esters de phorbol (par exemple, PMA) ou d'autres stimuli dans les tests cellulaires.

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