Anticorps polyclonal de lapin anti-PKC alpha pour WB, IHC-P, ELISA - P17252

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PKC alpha

• La protéine kinase C alpha (PKCα) est une sérine/thréonine-protéine kinase activée par le calcium, dépendante des phospholipides et du diacylglycérol (DAG), codée par le gène PRKCA. Elle appartient à la famille des PKC et contient des domaines à doigts de zinc caractéristiques ainsi qu'un site de liaison à l'ATP.
• La PKCα joue un rôle central dans la prolifération cellulaire, la différenciation, l'apoptose, la migration et l'adhésion cellulaires. Elle stimule la croissance cellulaire via la voie de signalisation MAPK/ERK médiée par RAF1 et peut également induire un arrêt du cycle cellulaire en régulant à la hausse les inhibiteurs de CDK CDKN1A et CDKN1B.
• Elle présente une activité anti-apoptotique dans les cellules cancéreuses ; par exemple, elle phosphoryle BCL2 pour bloquer l'apoptose et supprime l'activation de l'IGFBP3 médiée par p53/TP53 dans les cellules de gliome.
• Elle est fortement exprimée dans de nombreux cancers et agit comme promoteur tumoral, contribuant aux phénotypes malins des gliomes et des carcinomes mammaires.
• Dans le système cardiovasculaire, elle régule négativement la contractilité myocardique par phosphorylation de la troponine T cardiaque (TNNT2/CTNT) et médie l'hypertrophie des cardiomyocytes via la signalisation MAPK1/3 (ERK1/2).
• Elle est impliquée dans l'angiogenèse, l'agrégation plaquettaire et l'inflammation. Elle régule la migration des cellules endothéliales et la signalisation du VEGFA, et module les réponses des macrophages induites par le LPS.
• Sa localisation subcellulaire inclut le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau. Une translocation dépendante du stimulus se produit, par exemple le déplacement vers les lamellipodes après une blessure ou vers le noyau lors de la différenciation des macrophages.
• Les autres cibles de phosphorylation incluent DOCK8 (régulant la migration des lymphocytes T via l'activation de CDC42), KLHL3 (modulant l'interaction avec WNK4 en réponse à l'angiotensine II) et LRRK1 (contrôlant le trafic des protéines RAB). Références associées : PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à une région C-terminale (aa 573–672) de la PKC alpha humaine. Cette séquence est très conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée.
• Pour le Western blot, il est recommandé de commencer avec des dilutions comprises entre 1:500 et 1:2000 et de valider sur des lysats de lignées cellulaires ou de tissus connus pour exprimer la PKCα (par exemple cerveau, cœur, lignées cellulaires cancéreuses).
• En IHC-P, la récupération d'antigène peut être nécessaire ; optimisez les conditions de fixation et de récupération pour votre type d'échantillon. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En tant qu'anticorps polyclonal, les performances peuvent varier d'un lot à l'autre ; il est conseillé de titrer chaque nouveau lot et de confirmer la spécificité dans le système modèle concerné.

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