Anticorps polyclonal de lapin anti-PKC alpha pour WB, ELISA - P17252

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKC alpha

• PKC alpha (protéine kinase C alpha de type) est une sérine/thréonine-protéine kinase activée par le calcium, dépendante des phospholipides et du diacylglycérol, appartenant à la famille des PKC. Elle régule divers processus cellulaires, notamment la prolifération, l'apoptose, la différenciation, la migration et l'adhésion.
• Elle joue un double rôle dans le contrôle du cycle cellulaire : elle favorise la prolifération via l'activation de la voie RAF1/MAPK/ERK et la régulation à la hausse de CDKN1A, et déclenche également l'arrêt du cycle cellulaire avec hyperphosphorylation de RB1 et induction d'inhibiteurs de CDK après stimulation par le PMA.
• Elle exerce des fonctions anti-apoptotiques dans le cancer : elle supprime l'activation d'IGFBP3 médiée par TP53 dans les cellules de gliome et phosphoryle BCL2 dans les cellules leucémiques. Elle est fortement exprimée dans divers cancers et agit comme promoteur tumoral.
• Au niveau sous-cellulaire, elle se localise dans le cytoplasme, la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale et le noyau. Elle se transloque vers les lamellipodes après lésion, modulant l'adhésion desmosomiale et la motilité cellulaire.
• Pendant la migration des lymphocytes T CD4+ induite par les chimiokines, elle phosphoryle DOCK8, ce qui conduit à l'activation de CDC42 (PubMed:28028151). Références associées : PMID:28028151
• Dans les cardiomyocytes, elle médie la croissance hypertrophique via la voie MAPK1/3 et phosphoryle TNNT2, réduisant la contractilité myocardique. Elle est essentielle pour l'angiogenèse, la migration endothéliale et la signalisation VEGFA.
• Elle phosphoryle KLHL3 en réponse à l'angiotensine II, rompant l'interaction KLHL3-WNK4 (PubMed:25313067) ; elle phosphoryle LRRK1 pour réguler le trafic intracellulaire médié par RAB (PubMed:36040231). Références associées : PMID:25313067 PMID:36040231
• Elle intervient dans l'agrégation plaquettaire via les signaux CD36/GP4 et l'activation des intégrines, et module les réponses inflammatoires des macrophages au LPS, régulant parfois négativement NF-kappa-B.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu de la région C-terminale (acides aminés 573–672) de la PKC alpha humaine, ce qui peut offrir une spécificité d'isoforme ; la réactivité croisée avec d'autres isoformes de PKC doit être évaluée dans les systèmes d'essai appropriés.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 77 kDa est attendue ; validez l'expérience à l'aide de contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de lignées cellulaires humaines, murines ou de rat connues pour exprimer PKC alpha).
• Pour l'ELISA, optimisez les conditions de revêtement et la titration de l'anticorps pour obtenir la sensibilité souhaitée ; envisagez d'utiliser la protéine PKC alpha recombinante comme étalon.
• La pré-adsorption avec le peptide immunisant peut servir de contrôle négatif utile pour confirmer la spécificité de la bande en WB.

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