Anticorps monoclonal de lapin anti-PKC alpha pour WB/ELISA - P17252

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la protéine kinase C alpha

• La PKC alpha est une kinase sérine/thréonine qui joue un rôle essentiel dans la prolifération, la différenciation, l’apoptose, la migration et l’adhésion cellulaires en phosphorylant des cibles telles que RAF1, BCL2 et CSPG4, ou en modulant les cascades de signalisation MAPK/ERK et RAP1GAP.
• Elle exerce des fonctions à la fois promotrices et suppressives des tumeurs selon le contexte ; dans les gliomes et les cancers du sein, elle favorise la croissance cellulaire, tandis que dans certains types cellulaires, elle peut induire un arrêt du cycle cellulaire via RB1 et CDKN1A/B.
• Sa localisation subcellulaire est dynamique : la PKC alpha réside dans le cytoplasme, mais se transloque vers la membrane cellulaire, la membrane mitochondriale ou le noyau lors de son activation, permettant une signalisation spécifique au contexte.
• Dans les cellules immunitaires, elle régule la migration des lymphocytes T CD4+ en phosphorylant DOCK8, ce qui entraîne l’activation de CDC42. Références associées : PMID:28028151
• Dans le système cardiovasculaire, la PKC alpha régule négativement la contractilité myocardique, induit l’hypertrophie des cardiomyocytes via ERK1/2 et favorise l’angiogenèse en stabilisant l’ARNm de VEGFA et en améliorant la migration des cellules endothéliales.
• Elle phosphoryle KLHL3 afin de réguler le transport ionique en réponse à l’angiotensine II. Références associées : PMID:25313067
• Elle phosphoryle et active LRRK1 afin de contrôler le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:36040231
• Ses caractéristiques structurelles comprennent les domaines C2 et C1, responsables de la liaison au calcium et au DAG, ainsi qu’un domaine kinase doté d’un site de liaison à l’ATP ; des modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation et l’acétylation régulent son activité.
• Classée parmi les proto-oncogènes, la PKC alpha est une phosphoprotéine à doigt de zinc qui intègre les signaux provenant des facteurs de croissance, des hormones et des neurotransmetteurs.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, prévoir une bande à environ 77 kDa ; valider avec des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lysats de cellules HeLa ou A431) et des marqueurs de poids moléculaire.
• Cet anticorps convient à l’ELISA ; nous recommandons d’optimiser les concentrations d’anticorps par titrage avec un antigène positif connu.
• L’anticorps présente une réactivité croisée avec la PKC alpha humaine, murine et de rat, ce qui le rend largement applicable aux études menées chez ces espèces.
• Expédié dans des packs de glace ; dès réception, conserver à -20 °C pour une stabilité à long terme. Éviter les cycles répétés de congélation-décongélation.
• Envisager l’utilisation de tampons de blocage standard (par exemple, du lait écrémé en poudre à 5 %) et vérifier la spécificité à l’aide de contrôles négatifs appropriés et, si nécessaire, d’une extinction par siRNA.

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