Anticorps Monoclonal Lapin Anti-PKA C-alpha pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P17612

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de PKA C-alpha

• PKA C-alpha, codée par PRKACA, est la sous-unité catalytique alpha de la protéine kinase dépendante de l'AMPc. Deux isoformes existent : l'isoforme 1 est exprimée de manière ubiquitaire, tandis que l'isoforme 2 est spécifique aux spermatozoïdes et enrichie dans les spermatocytes au stade pachytène.
• En tant que sérine/thréonine kinase, elle phosphorylate de nombreux substrats dans le cytoplasme et le noyau, notamment NFKB1 (PubMed:15642694), VASP (PubMed:15642694, PubMed:20356841), RYR2 (PubMed:17693412) et ABL1 (PubMed:15178447). Ces événements régulent l'agrégation plaquettaire, la signalisation calcique et la capacitation des spermatozoïdes. Références connexes : PMID:15642694, PMID:20356841, PMID:17693412, PMID:15178447
• Elle se localise dans plusieurs compartiments, notamment le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, les mitochondries, les cils et les vésicules sécrétoires, reflétant ses rôles régulateurs diversifiés.
• Dans la voie de signalisation du hérisson (hedgehog), PKA C-alpha agit comme un inhibiteur clé en phosphorylant les facteurs de transcription GLI (PubMed:16705181). Cette phosphorylation favorise le traitement des GLI et empêche l'activation des gènes cibles, un processus antagonisé par la séquestration médiée par SMO (PubMed:36202993, PubMed:39138140). Références connexes : PMID:16705181, PMID:36202993, PMID:39138140
• La protéine est myristoylée et contient des domaines de liaison aux nucléotides et des domaines kinase, la classant comme une lipoprotéine et une transférase. Les variantes associées à des maladies sont liées au syndrome de Cushing.
• Elle phosphoryle également CDC25B pour empêcher la reprise de la méiose dans les ovocytes bloqués en prophase (Par similitude) et régule les jonctions serrées via la phosphorylation de CLDN3 (PubMed:15905176). Références connexes : PMID:15905176

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• L'immunogène (acides aminés 1-351 de PKA C-alpha humaine) couvre presque toute la protéine, suggérant une reconnaissance des deux isoformes. Envisagez de valider la spécificité de l'isoforme en utilisant des échantillons spécifiques à l'isoforme (par exemple, des cellules spermatiques pour l'isoforme 2).
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 40–41 kDa. Utilisez des témoins positifs appropriés (par exemple, lysats HeLa, Jurkat) et validez dans votre tissu cible.
• En immunofluorescence/ICC, un marquage nucléaire et cytoplasmique est attendu ; vérifiez la localisation subcellulaire dans vos conditions expérimentales.
• Pour ELISA, associez à un anticorps de capture approprié et confirmez la performance avec PKA C-alpha recombinante ou des échantillons biologiques pertinents.

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