Anticorps monoclonal anti-PKA C-alpha (PRKACA) validé par KD pour WB, IF/ICC, ELISA - P17612

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKA C-alpha (PRKACA)

• PRKACA code pour la sous-unité catalytique alpha de la protéine kinase dépendante de l'AMPc (PKA), une sérine/thréonine kinase qui phosphoryle de nombreux substrats cytoplasmiques et nucléaires, jouant un rôle central dans les cascades de signalisation de l'AMPc (PubMed:15642694, PubMed:15905176, PubMed:16387847). Références associées : PMID:15642694 PMID:15905176 PMID:16387847

• L'enzyme module la structure de la chromatine et la transcription en phosphorylant l'histone H1.4 et la sous-unité p50 de NF-kappa-B (NFKB1), influençant l'expression des gènes et l'activité de liaison à l'ADN (PubMed:15178447, PubMed:15642694, PubMed:15905176). Références associées : PMID:15178447 PMID:15642694 PMID:15905176

• Dans les plaquettes, PRKACA phosphoryle VASP pour maintenir les plaquettes circulantes dans un état de repos ; suite à une perturbation par la thrombine ou le collagène, la PRKACA active libre favorise l'agrégation plaquettaire (PubMed:15642694, PubMed:20356841). Références associées : PMID:15642694 PMID:20356841

• PRKACA agit comme un inhibiteur clé de la voie de signalisation smoothened en phosphorylant les facteurs de transcription GLI (GLI1, GLI2, GLI3), favorisant leur maturation et empêchant l'activation des gènes cibles en l'absence de ligands hedgehog (PubMed:16705181, PubMed:36202993, PubMed:39138140). Références associées : PMID:16705181 PMID:36202993 PMID:39138140

• Au niveau subcellulaire, PRKACA se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire, les mitochondries et des projections spécifiques comme les cils et les flagelles, reflétant ses rôles régulateurs divers. L'expression tissulaire est spécifique de l'isoforme : l'isoforme 1 est ubiquitaire, tandis que l'isoforme 2 est spécifique des spermatozoïdes et enrichie dans les spermatocytes pachytènes.

• Des modifications post-traductionnelles, notamment la myristoylation N-terminale et la phosphorylation, régulent son activité catalytique, son adressage subcellulaire et sa stabilité. L'épissage alternatif donne naissance aux isoformes distinctes.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant la protéine recombinante humaine PRKACA ; il présente une réactivité croisée avec l'humain, la souris et le rat, le rendant adapté aux études sur ces espèces. Validez les niveaux d'expression endogène dans votre système modèle avant les analyses quantitatives.
• Pour le WB, le poids moléculaire attendu est d'environ 41 kDa ; incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des lysats surexprimant PRKACA ou traités par siRNA) pour confirmer la spécificité de la bande.
• Pour l'IF/ICC, envisagez des protocoles de fixation/permeabilisation qui préservent l'antigénicité ; attendez-vous à des profils de marquage cytoplasmique et nucléaire cohérents avec la localisation rapportée.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps pour un rapport signal/bruit optimal et associez-le à un anticorps secondaire approprié ; validez les performances en utilisant une protéine recombinante ou des lysats cellulaires.
• Le statut "Validé par KD" indique que la spécificité de l'anticorps a été confirmée à l'aide d'approches de knockdown par siRNA ou shRNA ; envisagez d'inclure des contrôles de knockdown dans vos tests pour vérifier davantage la dépendance du signal à l'expression de la cible.

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