Anticorps monoclonal anti-PKA C-alpha (PRKACA) (validé par KD) pour WB, ELISA - P17612

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PKA C-alpha (PRKACA)

• PRKACA code pour la sous-unité alpha catalytique de la protéine kinase dépendante de l'AMPc, une sérine/thréonine kinase. Il existe deux isoformes : l'isoforme 1 ubiquitaire et l'isoforme 2 spécifique du sperme, enrichi dans les spermatocytes au stade pachytène.
• Il phosphoryle un large éventail de substrats dans le cytoplasme et le noyau, régulant la progression du cycle cellulaire, la transcription et l'apoptose. Références associées : PMID:15642694, PMID:15905176, PMID:16387847
• Régule la fonction plaquettaire : maintient l'état de repos via le complexe NF-kappa-B, tandis que la thrombine/collagène activent PRKACA pour phosphoryler VASP, favorisant l'agrégation plaquettaire. Références associées : PMID:15642694, PMID:20356841
• Inhibiteur clé de la signalisation Smoothened : phosphoryle les facteurs de transcription GLI, favorisant leur maturation et silençant les gènes cibles ; l'interaction avec SMO séquestre PRKACA au niveau de la membrane. Références associées : PMID:16705181, PMID:36202993, PMID:39138140
• Il se localise dans divers compartiments : cytoplasme, noyau, membrane cellulaire, mitochondrie, cils et vésicules de sécrétion.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent une myristoylation N-terminale et plusieurs sites de phosphorylation, qui influencent l'activité et la localisation.
• Association à la maladie : des mutations sont liées au syndrome de Cushing (PPNAD4).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la protéine PRKACA humaine recombinante pleine longueur ; cette conception peut offrir une couverture épitopique complète et permettre la détection des deux isoformes ainsi qu'une réactivité croisée avec la souris et le rat.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 41 kDa ; validez avec des contrôles positifs appropriés (par exemple HeLa, HEK293 ou des tissus exprimant PRKACA).
• Pour l'ELISA, envisagez l'association avec un anticorps de détection ciblant un épitope non chevauchant pour développer des essais sandwich.
• La validation par knockdown (KD Validé) indique que l'anticorps peut être utilisé pour confirmer la spécificité de la cible via des expériences de knockdown par siRNA/shRNA ; incluez les contrôles de knockdown pertinents.

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