Anticorps monoclonal lapin anti-PIM1 pour WB, IHC-P, ELISA - P11309

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PIM1

• PIM1 est une sérine/thréonine protéine kinase qui agit comme un proto-oncogène, favorisant la survie et la prolifération cellulaire et apportant un avantage sélectif lors de la tumorigenèse. Références associées : PMID:15528381, PMID:1825810, PMID:31548394
• Il exerce son activité oncogène en régulant l'activité transcriptionnelle de MYC et en phosphorylant/inhibant les protéines proapoptotiques BAD, MAP3K5 et FOXO3. Références associées : PMID:18593906
• PIM1 phosphoryle MAP3K5, réduisant son activité kinase et inhibant l'activation de la caspase-3 médiée par la voie JNK/p38MAPK et l'apoptose. Références associées : PMID:19749799
• La kinase favorise la progression du cycle cellulaire aux transitions G1-S et G2-M en phosphorylant CDC25A et CDC25C, et régule la stabilité et la localisation de CDKN1A et CDKN1B. Références associées : PMID:16356754, PMID:12431783, PMID:18593906
• PIM1 peut influencer la structure de la chromatine par phosphorylation de HP1 gamma/CBX3 et régule positivement la signalisation mTORC1 en phosphorylant et inhibant DEPDC5. Références associées : PMID:10664448, PMID:31548394
• Il phosphoryle et active ABCG2, contribuant à la résistance aux médicaments, et agit comme un régulateur négatif de l'immunité innée en phosphorylant GBP1. Références associées : PMID:18056989, PMID:37797010
• PIM1 se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire. Il est majoritairement exprimé dans les tissus hématopoïétiques et germinaux, et des isoformes ont été détectées dans le cancer de la prostate.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique correspondant à la région N-terminale (aa 1-100) de PIM1 humain. Cette région est conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée. Vérifiez l'homologie de séquence pour d'autres espèces si nécessaire.
• Pour le Western blot (WB), une bande spécifique d'environ 36 kDa est attendue. Incluez des contrôles positifs (par exemple HeLa, Jurkat) et négatifs appropriés pour confirmer la spécificité.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), des méthodes standard de récupération d'antigène peuvent être nécessaires. Envisagez de tester plusieurs tampons de récupération et optimisez la dilution de l'anticorps en fonction du type de tissu.
• En ELISA, utilisez une protéine PIM1 recombinante ou purifiée comme antigène de revêtement. Réalisez des titrations en échiquier pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps et d'antigène.
• Étant donné l'implication de la protéine dans plusieurs voies de signalisation, les résultats doivent être validés à l'aide d'approches complémentaires telles que l'extinction médiée par siRNA ou les essais de surexpression.

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