Anticorps polyclonal anti-PIK3CA pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42336

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PIK3CA

• PIK3CA code pour la sous-unité catalytique p110-alpha de la PI3K, une kinase lipidique qui phosphoryle le phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PtdIns(4,5)P2) pour générer le phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate (PIP3), un second messager essentiel.
  Références associées : PMID:15135396, PMID:23936502, PMID:28676499
• Le PIP3 recrute à la membrane des protéines contenant un domaine homologie à la pléckstrine (PH) comme AKT1 et PDPK1, initiant des cascades de signalisation qui favorisent la croissance cellulaire, la prolifération, la survie, la motilité et la réorganisation du cytosquelette.
• PIK3CA présente une activité sérine-protéine kinase intrinsèque, permettant l'autophosphorylation de la sous-unité régulatrice p85-alpha et la phosphorylation de substrats comme 4EBP1 et H-Ras, modulant potentiellement les voies de signalisation en aval.
  Références associées : PMID:23936502, PMID:28676499
• Il est activé par les récepteurs à tyrosine kinase (par ex. EGFR, récepteur de l'insuline, VEGFR) et RAS, jouant un rôle essentiel dans la signalisation des facteurs de croissance, l'angiogenèse et le développement vasculaire.
• PIK3CA est classé comme proto-oncogène ; des mutations somatiques gain de fonction sont fréquemment détectées dans un large éventail de cancers humains, conduisant à une activation incontrôlée de la voie PI3K/AKT.
• La protéine est également impliquée dans la phagocytose et la pinocytose, bien que les mécanismes exacts restent partiellement caractérisés (par similarité).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène comprend les acides aminés 401 à 600 de PIK3CA humain ; cette région centrale est bien conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui correspond à la réactivité croisée rapportée.
• Pour le Western blot, PIK3CA migre à un poids moléculaire prédit d'environ 124 kDa ; assurez-vous une résolution et un transfert suffisants lors de l'électrophorèse sur gel.
• Validez les performances de l'anticorps sur des lysats de contrôle positif pertinents (par ex. lignées cellulaires cancéreuses surexprimant PIK3CA ou stimulées par des facteurs de croissance) avant utilisation sur des échantillons expérimentaux.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), optimisez les protocoles de récupération d'antigène (par ex. récupération d'épitope par la chaleur) et envisagez de titrer la concentration de l'anticorps pour obtenir une coloration spécifique.
• Étant donné que PIK3CA est impliqué dans de nombreux réseaux de signalisation, incluez des inhibiteurs de voie appropriés dans les études fonctionnelles si vous utilisez l'anticorps pour la co-détection ou la co-immunoprécipitation.

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