Anticorps polyclonal de lapin anti-PIF4 pour WB et ELISA - Q8W2F3

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du facteur de transcription PIF4

• Le facteur de transcription PIF4, également appelé AtPIF4, bHLH9, EN102 et SRL2, est une protéine à domaine hélice-boucle-hélice basique codée par le gène PIF4 chez Arabidopsis thaliana. Il intègre les signaux lumineux et thermiques pour réguler la croissance.
• Il exerce une fonction négative dans la signalisation du phytochrome B, en contrôlant l'expression des gènes impliqués dans l'expansion cellulaire par liaison aux motifs boîte G (par similarité).
• Il est activé par les cryptochromes CRY1 et CRY2 sous faible lumière bleue, et se lie directement aux variants de la boîte E (5'-CA[CT]GTG-3') sur la chromatine pour stimuler l'expression de gènes assurant des réponses adaptatives comme l'élongation de l'hypocotyle. Références associées : PMID:26724867
• Il coopère avec le coactivateur transcriptionnel PTAC12/HMR/PAP5 et la sous-unité MED14 du médiateur pour réguler les gènes de croissance thermoréactive, principalement ceux impliqués dans la biosynthèse et la signalisation de l'auxine, favorisant la thermomorphogenèse comme l'élongation de l'hypocotyle à température élevée. Références associées : PMID:30635559 PMID:33824329 PMID:36063057
• Il est localisé exclusivement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle de facteur de transcription.
• Il est majoritairement exprimé dans les feuilles, les tiges et les plantules, à des niveaux plus faibles dans les fruits, les fleurs et les racines, ce qui témoigne de son importance dans la croissance végétative.
• Il est soumis à un épissage alternatif qui génère des variants protéiques pouvant ajuster son activité dans différents contextes développementaux et environnementaux.
• Poids moléculaire : 48,4 kDa (calculé à partir de la séquence) ; référencé dans le protéome de référence et impliqué dans la signalisation des phytochromes, la régulation de la transcription et les réponses au stress.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène utilisé est un peptide synthétique couvrant la région des acides aminés 300 à 400 de PIF4 d'Arabidopsis (NP_565991.2). Compte tenu de la nature polyclonale de cet anticorps, il peut reconnaître plusieurs épitopes et potentiellement réagir de manière croisée avec des protéines bHLH étroitement apparentées ; une validation dans votre système expérimental spécifique est recommandée.
• Pour le Western blot, utilisez des extraits totaux de cellules ou enrichis en noyau issus de tissus d'Arabidopsis thaliana comme les plantules ou les feuilles, où PIF4 est fortement exprimé. Une détection optimale peut nécessiter l'optimisation du blocage et de la dilution de l'anticorps.
• Cet anticorps est adapté pour l'ELISA, qui peut être utilisé pour la détection quantitative des niveaux de protéine PIF4 dans des lysats végétaux. Envisagez l'utilisation d'une courbe standard avec la protéine PIF4 recombinante pour une quantification précise.
• PIF4 intervenant dans les voies de signalisation lumineuse et thermique, les conditions expérimentales ( régime lumineux, température) doivent être soigneusement contrôlées pour éviter une modulation non intentionnelle de l'expression de PIF4.
• Le poids moléculaire prédit est de 48 kDa ; surveillez l'apparition potentielle de bandes de dégradation, et ajoutez des inhibiteurs de protéases lors de la préparation des échantillons.

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