Anticorps polyclonal de lapin anti-PICK1 pour IHC-P et ELISA - Q9NRD5

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de PICK1

• PICK1 (protéine de liaison à PRKCA), également appelée Protein interacting with C kinase 1 ou PRKCABP, agit comme une protéine adaptatrice qui se lie à diverses protéines membranaires et organise leur localisation subcellulaire par l'intermédiaire d'interactions avec le domaine PDZ.
• Elle joue un rôle essentiel dans la plasticité synaptique en régulant le trafic et l'internalisation des récepteurs du glutamate de type AMPA, potentiellement par l'intermédiaire de mécanismes dépendants de PRKCA.
• PICK1 inhibe de manière compétitive l'activité de nucléation de l'actine du complexe Arp2/3 avec les facteurs favorisant la nucléation, modulant ainsi la morphologie neuronale et l'endocytose des AMPAR.
• Elle est nécessaire au rétrécissement des épines dendritiques lors de la dépression à long terme (LTD) au niveau des synapses excitatrices, établissant un lien entre la dynamique de l'actine et l'affaiblissement synaptique.
• PICK1 se localise dans le cytoplasme, la région périnucléaire, la membrane, la densité postsynaptique, la synapse et le synaptosome, et s'associe au cytosquelette.
• Exprimée de manière ubiquitaire, PICK1 régule également la morphologie des astrocytes en antagonisant l'activateur d'Arp2/3 WASL/N-WASP.
• Parmi les autres fonctions rapportées figurent la régulation des canaux ioniques sensibles à l'acidité ASIC1/ASIC3.
• La protéine contient des sites de liaison aux métaux (zinc, calcium) et de modification lipidique (palmitoylation), et peut subir une phosphorylation.

Recommandations expérimentales et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 300–400 de PICK1 humain, à proximité de l'extrémité C-terminale. La cartographie de l'épitope suggère que l'anticorps peut reconnaître un épitope linéaire dans cette région ; envisagez d'utiliser le peptide pour une inhibition compétitive lors de l'ELISA afin de confirmer la spécificité.
• Pour l'IHC-P, les méthodes classiques de récupération antigénique, par chauffage ou enzymatique, sont recommandées, et les profils de coloration doivent refléter les localisations subcellulaires connues, telles que le cytoplasme et les densités postsynaptiques. Validez le produit sur du cerveau humain normal ou d'autres tissus exprimant PICK1.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité entre les lots peut survenir ; il est conseillé de réaliser des expériences préliminaires et d'inclure des témoins positifs et négatifs.
• Bien qu'il n'ait pas été initialement validé pour le Western blot, en cas d'essai en WB après dénaturation thermique, une détection de la bande cible à environ 47 kDa peut être observée ; l'optimisation du blocage et de la concentration d'anticorps est essentielle.

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