Anticorps monoclonal de lapin anti-PIAS1+PIAS2 pour WB, IHC-P, ELISA - O75925/O75928

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PIAS1/PIAS2

• PIAS1 agit comme une ligase E3 SUMO et un facteur d'ancrage SUMO, catalysant la SUMOylation de divers substrats. Il fonctionne comme un corégulateur transcriptionnel critique qui module les voies de signalisation STAT, p53 et des hormones stéroïdiennes, activant ou réprimant l'expression des gènes selon le contexte cellulaire. Références associées : PMID:11583632, PMID:11867732, PMID:14500712
• PIAS1 se lie aux séquences d'ADN riches en A/T in vitro et interagit directement avec les régions régulatrices des gènes, comme la boîte TAAT du promoteur MYOD1, pour réguler la liaison des facteurs de transcription indépendamment de son activité de SUMOylation. Références associées : PMID:15133049
• PIAS1 se localise principalement dans les speckles nucléaires et les corps PML, avec une présence supplémentaire dans le cytoplasme et une association avec le cytosquelette, facilitant ses rôles dans les processus nucléaires et la signalisation cytoplasmique.
• L'expression tissulaire est large, avec des niveaux particulièrement élevés dans les testicules, suggérant des fonctions spécialisées dans le développement des cellules germinales.
• PIAS1 sumoyle des facteurs clés de réparation et de chromatine : il stabilise MRE11 sur la chromatine pendant la résection des extrémités d'ADN et médie la sumoylation sélective de paralogues de MTA1 pour contrôler l'expression des gènes. Références associées : PMID:36050397, PMID:21965678
• Pendant l'infection virale, PIAS1 restreint la réplication lytique du virus d'Epstein-Barr (EBV) en inhibant les facteurs de transcription viraux ; le virus peut contourner cette restriction via le clivage de PIAS1 médié par les caspases. Références associées : PMID:29262325
• Cet anticorps reconnaît également PIAS2 (PIASx), une ligase E3 SUMO étroitement apparentée qui partage une grande similitude de séquence avec PIAS1 dans la région C-terminale et est impliquée dans des voies de régulation transcriptionnelle analogues.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 552–651 de PIAS1 humain ; lors d'un western blot, une bande principale d'environ 76 kDa est attendue pour PIAS1 et PIAS2.
• Pour le WB et l'IHC-P, envisagez d'utiliser des lysats témoins positifs provenant de testicules ou de lignées cellulaires exprimant des niveaux élevés de PIAS1/2, et validez l'anticorps avec des protéines recombinantes ou un knock-down par siRNA/shRNA.
• La dilution optimale de l'anticorps doit être déterminée empiriquement ; commencez avec 1:500–1:2000 pour le WB et 1:100–1:500 pour l'IHC-P dans des conditions standard.
• En raison de la forte conservation de la région de l'épitope, cet anticorps détecte également PIAS2, mais il est conseillé de confirmer la spécificité dans des modèles de knock-out ou de knock-down.
• Pour les applications ELISA, l'antigène de revêtement peut nécessiter une optimisation de la capture du peptide ou de la protéine ; envisagez d'utiliser le peptide immunogène comme témoin positif.

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