Anticorps polyclonal anti-PI3K p85α/p55γ/p85β pour WB, IF/ICC, ELISA - P27986 / O00459 / Q92569

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de PI3K p85α/p55γ/p85β (PIK3R1/PIK3R2/PIK3R3)

• Les sous-unités régulatrices de la PI3K p85α (PIK3R1), p55γ (PIK3R3) et p85β (PIK3R2) sont des adaptateurs non catalytiques qui relient la sous-unité catalytique p110 aux récepteurs tyrosine kinases activés. p85α contient deux domaines SH2 et un domaine SH3, se liant aux résidus tyrosine phosphorylés sur des récepteurs tels que FGFR, KIT, PDGFR et l'intégrine β2 (ITGB2), médiant ainsi le recrutement et l'activation membranaire de la PI3K. Références associées : PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• La sous-unité p85α joue un rôle essentiel dans la signalisation de l'insuline, favorisant la capture du glucose et la synthèse du glycogène dans les tissus sensibles à l'insuline, et module la réponse cellulaire au stress du réticulum endoplasmique en facilitant la translocation nucléaire de l'isoforme 2 de XBP1 lors d'une surcharge métabolique dans le foie. Références associées : PMID:20348923
• Ces sous-unités régulatrices existent sous plusieurs isoformes : PIK3R1 produit les isoformes p85α, p55α et p50α par épissage alternatif, tandis que PIK3R2 code pour p85β et PIK3R3 code pour p55γ. L'isoforme 2 (p50α) de PIK3R1 est principalement exprimée dans le muscle squelettique et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le rein et le muscle cardiaque.
• Au niveau subcellulaire, la protéine p85α se localise principalement dans le cytoplasme, où elle interagit à la fois avec les complexes récepteurs et la sous-unité catalytique p110.
• Des modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, régulent la stabilité et la signalisation de p85α ; la protéine est également un facteur hôte connu pour les interactions virales (MOTS-CLÉS : Acétylation, Phosphoprotéine, Conjugaison Ubl, Interaction hôte-virus).
• Les poids moléculaires prédits reflètent la diversité des isoformes : p85α et p85β migrent à environ 81–84 kDa, tandis que les isoformes plus courtes p55γ et p50α sont détectées autour de 42–54 kDa.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène a été conçu en utilisant une séquence peptidique conservée entre les acides aminés 400 et 500, commune à PIK3R1, PIK3R2 et PIK3R3, permettant la reconnaissance de multiples isoformes de sous-unités régulatrices et une réactivité croisée avec des échantillons humains, murins et de rat.
• Pour le transfert Western (WB), validez la dilution de l'anticorps primaire dans votre système d'échantillon spécifique ; une plage de départ de 1:500 à 1:2000 est souvent utilisée pour les polyclonaux de lapin, mais l'optimisation est cruciale pour résoudre les bandes attendues à ~42–54 kDa (p55γ/p50α) et ~81–84 kDa (p85α/p85β).
• En immunofluorescence/immunocytochimie (IF/ICC), incluez des contrôles appropriés (par exemple, IgG de lapin non immunisé) et envisagez des protocoles de perméabilisation qui préservent les épitopes cytoplasmiques.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; associez-le à un anticorps approprié contre la sous-unité catalytique p110 pour mettre en place des formats sandwich afin d'étudier la dynamique d'interaction de la PI3K.

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