Anticorps monoclonal de lapin anti-PI3 Kinase p85 alpha/beta pour WB, ELISA - P27986 / O00459

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la PI3 Kinase p85 alpha/bêta

• Codées par PIK3R1 (p85-alpha) et PIK3R2 (p85-bêta), ces sous-unités régulatrices de la phosphatidylinositol 3-kinase agissent comme des protéines adaptatrices reliant la sous-unité catalytique p110 aux récepteurs tyrosine kinases activés via des domaines SH2.
• Se lie aux protéines tyrosine kinases activées via son domaine SH2, médiant la translocation membranaire de l'unité catalytique p110. Essentielle pour la capture du glucose stimulée par l'insuline et la synthèse du glycogène dans les tissus sensibles à l'insuline, et participe aux voies de signalisation en aval des FGFR, KIT et PDGFR. Module les réponses au stress du RE en favorisant la translocation nucléaire de XBP1 dans le foie, contribuant à une meilleure tolérance au glucose. Références associées : PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429 PMID:20348923
• L'épissage alternatif génère de multiples isoformes ; l'isoforme 2 est principalement exprimée dans le muscle squelettique et le cerveau, avec des niveaux plus faibles dans le rein et le muscle cardiaque.
• La localisation subcellulaire est principalement cytoplasmique, où elle facilite la transduction du signal des récepteurs membranaires vers les effecteurs intracellulaires.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, influençant sa stabilité et son activité. Des mots-clés tels que domaine SH2, domaine SH3, interaction hôte-virus et variant pathologique (nanisme) soulignent ses rôles multifonctionnels.
• Agit comme un facteur hôte dans les interactions virales et est associée à des troubles du développement tels que le syndrome SHORT (nanisme).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide situé dans les acides aminés 400–500 de la p85 alpha/bêta humaine, une région conservée dans les deux isoformes, permettant la reconnaissance des variants alpha et bêta.
• Pour le Western blot (WB), valider l'anticorps dans des lysats de lignées cellulaires humaines ou murines connues pour exprimer la PI3K p85 (par exemple, HeLa, adipocytes 3T3-L1). Bandes attendues : ~42–54 kDa (principalement p85-alpha) et ~81–84 kDa (p85-bêta). Des bandes supplémentaires provenant d'isoformes d'épissage ou de produits de dégradation peuvent apparaître ; optimiser en conséquence la préparation du lysat et la charge de l'échantillon.
• Pour l'ELISA, envisagez de l'apparier avec un anticorps de capture/détection validé après tests internes. Vérifier la réactivité croisée avec les isoformes apparentées et utiliser des conditions de blocage et de lavage appropriées pour minimiser le bruit de fond.
• Étant donné que la réactivité croisée est indiquée pour l'humain et la souris, la conservation de la séquence cible doit être vérifiée si l'on souhaite l'étendre à d'autres espèces ; effectuer un alignement de séquences avant l'application.

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